酶解法分离原生质体不需要选择酶浓度,只需要根据酶制剂说明书使用即可。A. 正确B. 错误

动物受精卵的早期发育一般都要经过卵裂,囊胚,原肠胚和中胚层的发生等阶段。A. 正确B. 错误

如卵子未受精，其黄体于排卵后开始萎缩的时间是A. 6-8天B. 10-11天C. 12-13天D. 7-8天E. 9-10天

细胞工程是指以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。A. 对B. 错

【单选题】关于多肽结构描述错误的是A. 肽链从N端开始，C端结束B. 肽单元是平面结构C. 肽键具有局部双键性质，不能自由旋转D. 肽键呈顺式结构

酶解法分离植物原生质体需要纤维素酶和果胶酶。A. 正确B. 错误

25.（12分）CRISPR/CAS9基因组编辑技术源于细菌抵御噬菌体的机理研究。细菌被特定噬菌体感染后，细菌Cas2会随机切断人侵的嗞菌体DNA双链，并将切下的一个DNA片段（原型间隔序列）插入CRISPR位点（由间隔序列和重复序列交替排列组成的基因序列）的重复序列中，构成新的间隔序列，形成“免疫记忆”。当同种噬菌体再次入侵时，由CRISPR位点的新的间隔序列转录产生的crRNA便会将另一种蛋白质（如Cas9）准确带入到入侵者的原间隔序列DNA处，并将之切断，即“免疫灭杀”。CRISPR/Cas9基因编辑技术中sgRNA（单向导RNA）是根据靶基因设计的引导RNA，准确引导Cas9切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列CRISPR/Cas9系统进行基因编辑时，对DNA序列中的原型间隔序列相邻基序具有较高的编辑效率，如图所示。回答下列问题:原型间隔序列 PAM-|||-5` Cas9 3`-|||-3` 5`-|||-xi60-|||-5 II-|||-引导序列,20nt-|||-sgRNA bigcirc -|||-3（1）细菌Cas2基因表达Cas2的过程需要细菌提供_____________________等原料，Cas2和Cas9在功能上都属于_______________酶，可催化_________________（化学键）水解。（2）CRISPR/Cas9系统中的sgRNA与细菌体内的_____________功能相同，都可以与相应靶基因序列发生碱基互补配对。细菌利用该防御机制可以有效抵抗噬菌体的二次入侵，但是仍然会有部分噬菌体能够继续侵染已经获得免疫能力的宿主菌，原因可能是:___________（3）CR1SPR/Cas9基因编辑技术存在一定的脱靶效应：正常情况下，sgRNA通过20个核苷酸长度的引导序列与目标DNA序列发生碱基互补配对准确识别需要编辑的位点，然而有时会发生第18-20个碱基不匹配的情况，此时，Cas9可通过一个手指状的结构紧紧抓住错配区稳定住RNA-DNA双链，从而为Cas9切割DNA铺平道路，但这可能会导致Cas9在错误的基因位点切割双链DNA，从而引发潜在风险。请就如何降低脱靶效应，提出可能的思路:________________________（4）研究证实，人低氧诱导因子（HIF-1α）表达水平与肝癌的发生发展具有密切关系，HIF-1α在肝癌细胞中的表达水平明显高于正常肝细胞，使用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除HIF-1α基因为肝癌治疗提供了新途径。科研人员构建了靶向HIF-1α基因的CRISPR/Cas9重组质粒，并用重组质粒对肝癌细胞进行转染，利用其敲除肝癌细胞中的HIF-1α基因，并通过12孔板错选获得了基因敲除的混合克隆细胞株，然后用HIF-1α表达诱导剂（CoCl2）诱导相关细胞，提取蛋白，用Westernblot法（分离检测蛋白质的一种方法）检测HIF-1α蛋白的表达，以相应条带灰度值（越大）表示表达水平（越高）。下图为三类细胞HIF-1α蛋白的检测结果:原型间隔序列 PAM-|||-5` Cas9 3`-|||-3` 5`-|||-xi60-|||-5 II-|||-引导序列,20nt-|||-sgRNA bigcirc -|||-3请尝试分析图示实验结果及结论:____________________________

76.（1.0分）原生质体培养时，pH对酶的活力和细胞活力有影响。（）A. 对B. 错

有些遗传病家系看不到垂直遗传的现象，这是因为( )A. 该遗传病是体细胞遗传病B. 该遗传病是线粒体病C. 该病是性连锁遗传病D. 该遗传病具有传染性

细胞工程的主要研究内容有哪几项?A. 植物细胞与组织培养B. 动物细胞与组织培养C. 细胞融合D. 染色体工程E. 胚胎工程F. 核移植与克隆