题目
菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检样品进行卫生学评估提供证据。如图是某样品培养简化流程图，请分析回答下列问题： →-|||-样品 样品悬液 梯度稀释 涂布 （1）该培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、 ______ 法灭菌等。 （2）实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000r•min-1处理1min，其目的是 ______ 。样品稀释时取1mL原液加入 ______ 中，稀释10倍。涂布器一般是在酒精中浸泡，然后酒精火焰上引燃灭菌，该操作的目的 ______ 。 （3）本实验用菌落计数的原理是基于 ______ ，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏 ______ ，原因是 ______ 。通常对获得的纯菌种可以依据菌落的 ______ （至少填3个）等菌落特征对微生物进行初步鉴定（或分类）。 （4）用菌落计数的具体培养结果如表。选取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围，以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数；若比值大于2，则报告稀释度较低（稀释次数越多，稀释度越高）的培养皿菌落数。请填写例次2、3中“?”处的菌落总数分别为 ______ 、 ______ 。 例次 不同稀释度平均菌落数 两稀释度菌落数之比 菌落总数 10-1 10-2 10-3 1 1365 164 20 - 16400 2 2760 295 46 1.6 ? 3 2890 271 60 2.2 ?
菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检样品进行卫生学评估提供证据。如图是某样品培养简化流程图，请分析回答下列问题：
（1）该培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、 ______ 法灭菌等。
（2）实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000r•min-1处理1min，其目的是 ______ 。样品稀释时取1mL原液加入 ______ 中，稀释10倍。涂布器一般是在酒精中浸泡，然后酒精火焰上引燃灭菌，该操作的目的 ______ 。
（3）本实验用菌落计数的原理是基于 ______ ，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏 ______ ，原因是 ______ 。通常对获得的纯菌种可以依据菌落的 ______ （至少填3个）等菌落特征对微生物进行初步鉴定（或分类）。
（4）用菌落计数的具体培养结果如表。选取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围，以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数；若比值大于2，则报告稀释度较低（稀释次数越多，稀释度越高）的培养皿菌落数。请填写例次2、3中“?”处的菌落总数分别为 ______ 、 ______ 。
（1）该培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、 ______ 法灭菌等。
（2）实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000r•min-1处理1min，其目的是 ______ 。样品稀释时取1mL原液加入 ______ 中，稀释10倍。涂布器一般是在酒精中浸泡，然后酒精火焰上引燃灭菌，该操作的目的 ______ 。
（3）本实验用菌落计数的原理是基于 ______ ，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏 ______ ，原因是 ______ 。通常对获得的纯菌种可以依据菌落的 ______ （至少填3个）等菌落特征对微生物进行初步鉴定（或分类）。
（4）用菌落计数的具体培养结果如表。选取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围，以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数；若比值大于2，则报告稀释度较低（稀释次数越多，稀释度越高）的培养皿菌落数。请填写例次2、3中“?”处的菌落总数分别为 ______ 、 ______ 。
| 例次 | 不同稀释度平均菌落数 | 两稀释度菌 落数之比 | 菌落总数 | ||
| 10-1 | 10-2 | 10-3 | |||
| 1 | 1365 | 164 | 20 | - | 16400 |
| 2 | 2760 | 295 | 46 | 1.6 | ? |
| 3 | 2890 | 271 | 60 | 2.2 | ? |
题目解答
答案
高压蒸汽灭菌 尽量使样品中的微生物细胞分散 9ml无菌水 杀死杂菌 一个菌落代表一个活菌 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 形状、大小、颜色、隆起程度 37750 27100
解析
步骤 1：培养基配制
培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、高压蒸汽灭菌法灭菌等。
步骤 2：样品处理
实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000r•min^{-1}处理1min，其目的是尽量使样品中的微生物细胞分散。样品稀释时取1mL原液加入9ml无菌水中，稀释10倍。涂布器一般是在酒精中浸泡，然后酒精火焰上引燃灭菌，该操作的目的杀死杂菌。
步骤 3：菌落计数原理
本实验用菌落计数的原理是基于一个菌落代表一个活菌，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。通常对获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小、颜色、隆起程度等菌落特征对微生物进行初步鉴定（或分类）。
步骤 4：菌落总数计算
例次2中，10^{-2}和10^{-3}的平均菌落数分别为295和46，比值为1.6，小于2，因此取平均数，菌落总数为(295+46)×10^{2}=37750。例次3中，10^{-2}和10^{-3}的平均菌落数分别为271和60，比值为2.2，大于2，因此报告稀释度较低的培养皿菌落数，菌落总数为271×10^{2}=27100。
培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、高压蒸汽灭菌法灭菌等。
步骤 2：样品处理
实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10000r•min^{-1}处理1min，其目的是尽量使样品中的微生物细胞分散。样品稀释时取1mL原液加入9ml无菌水中，稀释10倍。涂布器一般是在酒精中浸泡，然后酒精火焰上引燃灭菌，该操作的目的杀死杂菌。
步骤 3：菌落计数原理
本实验用菌落计数的原理是基于一个菌落代表一个活菌，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。通常对获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小、颜色、隆起程度等菌落特征对微生物进行初步鉴定（或分类）。
步骤 4：菌落总数计算
例次2中，10^{-2}和10^{-3}的平均菌落数分别为295和46，比值为1.6，小于2，因此取平均数，菌落总数为(295+46)×10^{2}=37750。例次3中，10^{-2}和10^{-3}的平均菌落数分别为271和60，比值为2.2，大于2，因此报告稀释度较低的培养皿菌落数，菌落总数为271×10^{2}=27100。