140.2004年3月15日前后，阜阳当地电视台连续7天报道了当地大量婴幼儿食用劣质奶粉后变成“大头娃娃”的消息，这种奶粉由于蛋白质含量严重不足，根本不能满足婴儿的生长需要，被称为“空壳奶粉”。其之所以能通过验收，是因为其中加入如三聚氰胺等物质，说明当年所用蛋白定量方法为()A. 双缩脲法B. 凯氏定氮法C. 苟三酮法D. 紫外分光光度法

本题考查蛋白质定量方法的原理及实际应用。关键点在于理解不同检测方法的核心依据：

• 凯氏定氮法通过测定氮含量推算蛋白质含量（蛋白质含氮量固定），而三聚氰胺含氮量高，可虚假提升检测结果。
• 双缩脲法直接检测蛋白质肽键，需蛋白质结构完整。
• 其他方法（如紫外分光光度法）易受干扰或精度不足。

选项分析

1. 凯氏定氮法：

   • 原理：通过消化、蒸馏、滴定步骤测氮，再乘以6.25估算蛋白质含量。
   • 关键：仅依赖氮含量，与蛋白质实际结构无关。
   • 漏洞：添加含氮物质（如三聚氰胺）会虚假提高检测值。

2. 双缩脲法：

   • 原理：蛋白质肽键与Cu²⁺形成紫色络合物，颜色深浅反映蛋白质量。
   • 关键：需完整肽键结构。
   • 局限：若奶粉中蛋白质被破坏或被非蛋白含氮物替代，无法检测。

3. 其他方法：

   • 苟三酮法/紫外分光光度法：易受杂质干扰或精度低，非主流检测手段。

结论

劣质奶粉通过添加三聚氰胺（含氮量高）欺骗检测，说明当年采用凯氏定氮法（仅测氮不测蛋白本身）。