题目
对质粒DNA的酶切实验的叙述,正确的是()。A. 酶切所用的酶通常被称为限制性核酸内切酶B. 添加酶切体系各种成分时要求戴手套操作C. 所用的枪头、反应管等原则上要求高压蒸汽灭菌D. 操作前,务必明确所用酶的最适反应温度E. 样品是质粒DNA时,单酶切的预期电泳结果是一条带,双酶切是两条带
对质粒DNA的酶切实验的叙述,正确的是()。
A. 酶切所用的酶通常被称为限制性核酸内切酶
B. 添加酶切体系各种成分时要求戴手套操作
C. 所用的枪头、反应管等原则上要求高压蒸汽灭菌
D. 操作前,务必明确所用酶的最适反应温度
E. 样品是质粒DNA时,单酶切的预期电泳结果是一条带,双酶切是两条带
题目解答
答案
ABD
A. 酶切所用的酶通常被称为限制性核酸内切酶
B. 添加酶切体系各种成分时要求戴手套操作
D. 操作前,务必明确所用酶的最适反应温度
A. 酶切所用的酶通常被称为限制性核酸内切酶
B. 添加酶切体系各种成分时要求戴手套操作
D. 操作前,务必明确所用酶的最适反应温度
解析
本题考查质粒DNA酶切实验的相关知识,解题思路是对每个选项所涉及的酶切实验操作要点和原理进行逐一分析判断。
- A选项:
- 酶切实验中用于切割DNA的酶通常就是限制性核酸内切酶,它能够识别特定的核苷酸序列并在特定的位点进行切割,所以A选项正确。
- B选项:
- 在添加酶切体系各种成分时戴手套操作是为了防止手上的杂质、酶等污染反应体系,保证实验的准确性和可靠性,所以B选项正确。
- C选项:
- 所用的枪头、反应管等原则上要求无菌处理,但不一定是高压蒸汽灭菌。因为高压蒸汽灭菌可能会使一些酶失活,一般采用干热灭菌或过滤除菌等方法,所以C选项错误。
- D选项:
- 不同的限制性核酸内切酶有其最适反应温度,操作前明确所用酶的最适反应温度,才能保证酶的活性,使酶切反应顺利进行,所以D选项正确。
- E选项:
- 样品是质粒DNA时,单酶切如果质粒是环状的,切割后会变成线性的一条带;但如果质粒有多个相同的酶切位点,单酶切可能会产生多条带。双酶切如果两个酶切位点不同,一般会产生两条带,但如果两个酶切位点非常接近,也可能会出现其他情况,所以E选项错误。