在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？A. 凯氏定氮法B. 双缩脲反应C. 紫外吸收法D. 茚三酮法

考查要点：本题主要考查学生对不同蛋白质检测方法原理的理解，特别是各方法是否依赖完整的肽链结构。

解题核心思路：
需明确每种检测方法的作用对象：

• 凯氏定氮法：通过测定氮含量推算蛋白质，与肽链完整性无关。
• 双缩脲反应：依赖肽键的存在，需完整的肽链。
• 紫外吸收法：基于芳香族氨基酸的共轭双键，与肽链结构无关。
• 茚三酮法：检测游离氨基酸，与肽链分解后的产物反应。

破题关键点：
双缩脲反应的显色条件是肽链中至少存在两个以上肽键，因此必须保持完整的肽链结构；其他方法均不直接依赖肽链完整性。

选项分析

A. 凯氏定氮法

• 原理：通过测定样品中的氮含量推算蛋白质含量。
• 关键点：蛋白质中的氮被完全释放后检测，与肽链是否完整无关。即使蛋白质分解为氨基酸，氮仍可被检测。

B. 双缩脲反应

• 原理：双缩脲试剂与肽链中的肽键反应，形成紫色络合物。
• 关键点：必须存在完整的肽链（至少两个肽键），单个氨基酸无法显色。

C. 紫外吸收法

• 原理：蛋白质中芳香族氨基酸（如酪氨酸、色氨酸）的共轭双键在280nm处有特征吸收。
• 关键点：检测的是芳香基团的存在，与肽链是否展开或变性无关。

D. 茚三酮法

• 原理：茚三酮与游离氨基酸的α-氨基反应生成蓝紫色化合物。
• 关键点：需蛋白质分解为氨基酸，与完整肽链无关。