离子交换层析有效分离蛋白质的依据是A. 配体的特异性亲和力B. 蛋白所带电荷C. 蛋白的溶解度D. 蛋白的plE. 蛋白的分子大小

本题考查离子交换层析分离蛋白质的原理。解题思路是明确离子交换层析的基本概念和作用机制，然后分析每个选项与该机制的相关性。

离子交换层析是一种基于蛋白质表面电荷性质进行分离的技术。其固定相是带有电荷的离子交换树脂，流动相是含有缓冲液的溶液。当蛋白质混合样品通过离子交换层析柱时，不同蛋白质由于所带电荷的性质和数量不同，与离子交换树脂上的电荷基团之间的相互作用也不同，从而导致它们在层析柱中的保留时间不同，最终实现分离。

下面对每个选项进行分析：

• A选项：配体的特异性亲和力是亲和层析的依据，亲和层析是利用生物分子间的特异性亲和力进行分离的技术，并非离子交换层析，所以A选项错误。
• B选项：如前面所述，离子交换层析正是根据蛋白所带电荷的差异来分离蛋白质的。当蛋白质所带电荷与离子交换树脂上的电荷相反时，蛋白质会与树脂结合；而改变流动相的离子强度或pH值等条件，可以使结合的蛋白质从树脂上洗脱下来。不同蛋白质所带电荷不同，洗脱条件也不同，从而实现分离，所以B选项正确。
• C选项：蛋白的溶解度主要影响蛋白质在溶液中的存在状态，与离子交换层析的分离原理并无直接关联，所以C选项错误。
• D选项：蛋白的等电点（pI）是指蛋白质在某一pH值溶液中所带净电荷为零的pH值。虽然等电点与蛋白质所带电荷有关，但离子交换层析直接依据的是蛋白质在当前溶液环境下所带的实际电荷，而不是等电点本身，所以D选项错误。
• E选项：蛋白的分子大小是凝胶过滤层析（分子筛层析）的分离依据，凝胶过滤层析是根据蛋白质分子大小不同，在凝胶颗粒的孔隙中扩散和通过的速度不同来实现分离的，并非离子交换层析，所以E选项错误。