用到抽真空操作的保藏方法有A. 斜面保藏法B. 沙土管保藏法C. 液氮法D. 冷冻干燥法

本题考查微生物保藏方法中涉及抽真空操作的判断。关键点在于理解各保藏方法的核心原理及具体操作步骤：

• 斜面保藏法通过低温和控制氧气环境保存，无需抽真空；
• 沙土管保藏法利用干燥沙土隔绝氧气，主要依赖吸湿性而非真空；
• 液氮法通过超低温保存，核心是快速冷冻和液氮环境，抽真空非必要步骤；
• 冷冻干燥法需在真空条件下进行升华干燥，抽真空是必要操作。

选项分析

A. 斜面保藏法

• 原理：将微生物接种于斜面固体培养基，低温（4℃）保存。
• 关键操作：密封保存，通过降低代谢活性和减少氧气接触延长保藏时间，不涉及抽真空。

B. 沙土管保藏法

• 原理：将微生物与干燥沙土混合，低温保存。
• 关键操作：沙土吸湿性强，通过干燥环境隔绝氧气，无需抽真空。

C. 液氮法

• 原理：利用液氮超低温（-196℃）使微生物快速玻璃化。
• 关键操作：需快速冷冻和液氮浸泡，抽真空非必要步骤。

D. 冷冻干燥法

• 原理：先低温冷冻微生物悬液，再在真空环境下直接升华干燥。
• 关键操作：必须抽真空以降低水的熔点，加速干燥过程，同时保护微生物结构。