下列各题共用备选答案A. 蛋白质紫外吸收的最大波长280nmB. 蛋白质是两性电解质C. 蛋白质分子大小不同D. 蛋白质多肽链中氨基酸是借肽键相连E. 蛋白质溶液为亲水胶体分子筛(凝胶层析)分离蛋白质的依据是

考查要点：本题主要考查分子筛（凝胶层析）分离蛋白质的原理，需明确不同蛋白质分离技术的核心依据。

解题核心思路：
分子筛层析的关键在于蛋白质分子大小的差异。凝胶材料的多孔结构允许小分子进入颗粒内部，而大分子被阻挡在外，导致不同分子量的蛋白质在层析柱中的移动路径不同，从而实现分离。

破题关键点：

• 排除干扰选项：
  • A（紫外吸收）用于蛋白质检测，与分离无关。
  • B（两性电解质）对应电泳法（利用带电差异）。
  • D（肽键连接）描述蛋白质结构，与分离无关。
  • E（亲水胶体）可能涉及透析法（半透膜原理）。
• 唯一符合分子筛原理的是C（分子大小不同）。

分子筛（凝胶层析）的工作原理如下：

1. 凝胶材料的多孔结构：凝胶颗粒内部具有不同孔径的通道。
2. 分子筛效应：
   • 大分子无法进入颗粒内部，仅沿颗粒外表面移动，路径短，移动速度快，先流出层析柱。
   • 小分子可自由进入颗粒内部，移动路径长，移动速度慢，后流出层析柱。
3. 分离结果：蛋白质按分子量从大到小依次被洗脱，实现分离。

关键结论：

• 分子大小差异是分子筛分离蛋白质的唯一依据，对应选项C。