理论上,当载体中正确地插入了目的片段时会出现 A. 蓝斑B. 白斑C. 蓝斑、白斑均可能出现D. 蓝斑、白斑均不出现E. 其余选项都不是

本题考查基因工程中载体与目的基因重组后的筛选原理。关键点在于理解蓝白斑筛选法的工作机制：

1. 载体特性：常用载体（如pUC系列）含有lacZ'基因（负责蓝白斑筛选）和抗性基因（如氨苄青霉素抗性基因）。
2. 插入效应：当目的基因插入到lacZ'基因的多克隆位点时，会破坏lacZ'的结构，导致无法表达完整的β-半乳糖苷酶。
3. 显色反应：培养基中的X-gal和IPTG诱导下，完整lacZ'基因的菌落会形成蓝斑，而插入失活的菌落因无法分解X-gal形成白斑。

蓝白斑筛选原理

1. 载体预设条件：载体的lacZ'基因编码β-半乳糖苷酶的α-肽链，但需与宿主细胞提供的ω-肽链结合才能形成有活性的酶。
2. 插入目的基因的影响：
   • 未插入：lacZ'基因完整，细菌能在X-gal和IPTG存在下产生蓝色物质，形成蓝斑。
   • 正确插入：目的基因插入lacZ'基因，使其失活，无法产生α-肽链，导致β-半乳糖苷酶无法形成，X-gal不显色，形成白斑。
3. 筛选结果：白斑表明载体中成功插入了外源DNA。

选项分析

• A. 蓝斑：错误，蓝斑表示lacZ'基因未被破坏，说明未插入或插入位置不影响lacZ'。
• B. 白斑：正确，插入目的基因导致lacZ'失活，无法显蓝。
• C. 蓝斑、白斑均可能出现：错误，同一载体中插入后只能出现一种表型。
• D. 蓝斑、白斑均不出现：错误，未插入时会出现蓝斑，而非无色。
• E. 其余选项都不是：错误，B选项已正确描述。