【题文】在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？A. 凯氏定氮法B. 双缩尿反应C. 紫外吸收法D. 茚三酮法

考查要点：本题主要考查学生对不同蛋白质检测方法原理的理解，特别是这些方法是否依赖完整的肽链结构。

解题核心思路：
需明确每种检测方法的作用对象：

• 凯氏定氮法：通过测定氮含量推算蛋白质，需破坏肽键释放氮。
• 双缩尿反应：依赖肽链中的肽键显色，需至少两个肽键。
• 紫外吸收法：基于芳香族氨基酸的共轭双键吸收，与肽链完整性无关。
• 茚三酮法：检测α-氨基，适用于游离或结合的氨基酸。

破题关键点：
双缩尿反应的显色条件是存在多肽链，而其他方法不直接依赖完整的肽链结构。

选项分析

A. 凯氏定氮法

• 原理：通过高温消化破坏蛋白质，释放氮元素，转化为氨后滴定计算含量。
• 关键点：需分解肽键，破坏肽链。
• 结论：不依赖完整肽链。

B. 双缩尿反应

• 原理：双缩试剂（Cu²⁺）与肽链中的肽键反应，形成紫色络合物。
• 关键点：至少需要二肽（含两个肽键）才能显色，单个氨基酸不反应。
• 结论：依赖完整肽链（或多肽结构）。

C. 紫外吸收法

• 原理：蛋白质中芳香族氨基酸（如酪氨酸）的共轭双键在280nm处有特征吸收。
• 关键点：检测的是氨基酸侧链结构，与肽链是否完整无关。
• 结论：不依赖完整肽链。

D. 茚三酮法

• 原理：α-氨基与茚三酮反应生成蓝紫色化合物，适用于检测氨基酸或肽链末端的氨基。
• 关键点：即使肽链被分解为单个氨基酸仍可显色。
• 结论：不依赖完整肽链。