题目
以下为大肠杆菌胞内表达的重组干扰素纯化设计的中试方案,正确的是()A. 发酵液离心后收集上清,膜滤浓缩B. 收集菌体使用超声波破壁方法C. 收集菌体,用碱裂法加入 NaOH 和 SDS 破壁D. 收集菌体用高压匀浆法破壁
以下为大肠杆菌胞内表达的重组干扰素纯化设计的中试方案,正确的是()
A. 发酵液离心后收集上清,膜滤浓缩
B. 收集菌体使用超声波破壁方法
C. 收集菌体,用碱裂法加入 NaOH 和 SDS 破壁
D. 收集菌体用高压匀浆法破壁
题目解答
答案
D. 收集菌体用高压匀浆法破壁
解析
步骤 1:理解干扰素的表达位置
干扰素是一种蛋白质,通常在大肠杆菌中进行胞内表达。这意味着干扰素存在于细胞内部,而不是在细胞外的培养基中。
步骤 2:确定正确的收集方法
由于干扰素存在于细胞内部,因此需要收集菌体,而不是直接收集上清液。选项 A 不正确,因为它建议收集上清液,这将导致干扰素丢失。
步骤 3:选择合适的破壁方法
为了从细胞中提取干扰素,需要破坏细胞壁。选项 B 和 C 提供了两种破壁方法:超声波破壁和碱裂法。然而,超声波破壁可能不适用于大规模生产,因为它可能不够高效。碱裂法虽然有效,但可能对蛋白质结构造成损害,影响干扰素的活性。选项 D 提供了高压匀浆法,这是一种高效且适用于大规模生产的破壁方法,可以有效地从细胞中提取干扰素。
干扰素是一种蛋白质,通常在大肠杆菌中进行胞内表达。这意味着干扰素存在于细胞内部,而不是在细胞外的培养基中。
步骤 2:确定正确的收集方法
由于干扰素存在于细胞内部,因此需要收集菌体,而不是直接收集上清液。选项 A 不正确,因为它建议收集上清液,这将导致干扰素丢失。
步骤 3:选择合适的破壁方法
为了从细胞中提取干扰素,需要破坏细胞壁。选项 B 和 C 提供了两种破壁方法:超声波破壁和碱裂法。然而,超声波破壁可能不适用于大规模生产,因为它可能不够高效。碱裂法虽然有效,但可能对蛋白质结构造成损害,影响干扰素的活性。选项 D 提供了高压匀浆法,这是一种高效且适用于大规模生产的破壁方法,可以有效地从细胞中提取干扰素。