题目
关于载体DNA和目的DNA连接的叙述不正确的是 ( )A. 需要DNA连接酶B. 可以借助于末端核苷酸转移酶C. 可以合成人工连接器D. 具有粘性末端的切口连接最牢固E. 以上均不正确
关于载体DNA和目的DNA连接的叙述不正确的是 ( )
A. 需要DNA连接酶
B. 可以借助于末端核苷酸转移酶
C. 可以合成人工连接器
D. 具有粘性末端的切口连接最牢固
E. 以上均不正确
题目解答
答案
E. 以上均不正确
解析
本题考查DNA重组技术中载体与目的基因连接的相关知识,需明确不同连接方法的原理及适用场景。关键点在于区分DNA连接酶的作用与其他辅助酶的功能,以及不同连接方式的特点。需注意:
- DNA连接酶是连接必需的工具;
- 末端转移酶仅用于制备同聚物尾,不直接参与连接;
- 人工连接器(如接头)可实现不同末端的连接;
- 粘性末端连接比平末端更牢固。
选项分析
A. 需要DNA连接酶
正确。DNA连接酶通过催化磷酸二酯键形成,将目的基因与载体连接,是连接过程的核心工具。
B. 可以借助于末端核苷酸转移酶
正确。末端转移酶用于在平末端添加同聚物尾(如dGTP尾),使平末端转化为粘性末端,从而为后续连接创造条件,但连接本身仍需DNA连接酶。
C. 可以合成人工连接器
正确。人工连接器(如化学合成的接头)可提供特定粘性末端,用于连接不同来源的DNA片段。
D. 具有粘性末端的切口连接最牢固
正确。粘性末端通过碱基互补配对形成更稳定的连接,而平末端连接效率低且易错位。
E. 以上均不正确
错误。所有选项A-D均正确,因此E选项不成立。