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T-DNA插入失活是研究植物基因功能的常用方法,研究者将带有卡那霉素抗性基因的T-DNA插入拟南芥2号染色体的A基因内,使其突变为丧失功能的a基因,花粉中A基因功能的缺失会造成其不育。回答下列问题:(1)基因内碱基的增添、缺失或 ____ 都可导致基因突变。(2)以Aa植株为 ____ (填“父本”或“母本”)与野生型拟南芥杂交,F1中卡那霉素抗性植株的占比为0,其反交的F1中卡那霉素抗性植株的占比为 ____ 。(3)为进一步验证基因A的功能,将另一个A基因插入Aa植株的3号染色体。仅考虑基因A和a,该植株会产生 ____ 种基因型的可育花粉,其中具有a基因的花粉占比为 ____ 。该植株自交得到F1。利用图1所示引物P1和P2、P1和P3分别对F1进行PCR检测,电泳结果如图2所示。根据电泳结果F1植株分为Ⅰ型和Ⅱ型,其中Ⅰ型植株占比为 ____ 。F1中没有检测到仅扩增出600bp条带的植株,其原因为 ____ 。900bp-|||-P1-|||-A基因-|||-P2 植株类型: I Ⅱ-|||-600bp 引物组合: +P2 P1+P3P1+P2 P1+P3-|||-P1-|||-a基因 T-DNA 900bp-|||-P3 600bp-|||-图1 图2(4)实验中还获得了一个E基因被T-DNA插入突变为e基因的植株,e基因纯合的种子不能正常发育而退化。为分析基因E/e和A/a在染色体上的位置关系,进行下列实验:①利用基因型为AaEE和AAEe的植株进行杂交,筛选出基因型为 ____ 的F1植株。②选出的F1植株自交获得F2。不考虑其他突变,若F2植株中花粉和自交所结种子均发育正常的植株占比为0,E/e和A/a在染色体上的位置关系及染色体交换情况为 ____ ;若两对基因位于非同源染色体,该类植株的占比为 ____ 。除了上述两种占比,分析该类植株还可能的其他占比和原因: ____ 。

T-DNA插入失活是研究植物基因功能的常用方法,研究者将带有卡那霉素抗性基因的T-DNA插入拟南芥2号染色体的A基因内,使其突变为丧失功能的a基因,花粉中A基因功能的缺失会造成其不育。回答下列问题:
(1)基因内碱基的增添、缺失或 ____ 都可导致基因突变。
(2)以Aa植株为 ____ (填“父本”或“母本”)与野生型拟南芥杂交,F1中卡那霉素抗性植株的占比为0,其反交的F1中卡那霉素抗性植株的占比为 ____ 。
(3)为进一步验证基因A的功能,将另一个A基因插入Aa植株的3号染色体。仅考虑基因A和a,该植株会产生 ____ 种基因型的可育花粉,其中具有a基因的花粉占比为 ____ 。该植株自交得到F1。利用图1所示引物P1和P2、P1和P3分别对F1进行PCR检测,电泳结果如图2所示。根据电泳结果F1植株分为Ⅰ型和Ⅱ型,其中Ⅰ型植株占比为 ____ 。F1中没有检测到仅扩增出600bp条带的植株,其原因为 ____ 。
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(4)实验中还获得了一个E基因被T-DNA插入突变为e基因的植株,e基因纯合的种子不能正常发育而退化。为分析基因E/e和A/a在染色体上的位置关系,进行下列实验:
①利用基因型为AaEE和AAEe的植株进行杂交,筛选出基因型为 ____ 的F1植株。
②选出的F1植株自交获得F2。不考虑其他突变,若F2植株中花粉和自交所结种子均发育正常的植株占比为0,E/e和A/a在染色体上的位置关系及染色体交换情况为 ____ ;若两对基因位于非同源染色体,该类植株的占比为 ____ 。除了上述两种占比,分析该类植株还可能的其他占比和原因: ____ 。

题目解答

答案

(1)基因突变是指DNA分子上碱基的增添、缺失或替换引起基因碱基序列的改变。
(2)以Aa植株为父本与野生型(AA)拟南芥杂交,其含a基因的花粉不育,含A基因的花粉可育,F1(AA)中卡那霉素抗性植株的占比为0;反交时,Aa植株作为母本,产生的A、a两种配子,比例为1:1,而野生型父本只产生一种含A基因花粉,F1基因型为Aa(抗性):AA(非抗性)=1:1,因此卡那霉素抗性植株占比为$\frac{1}{2}$。
(3)将另一个A基因插入Aa植株的3号染色体后,仅考虑基因A和a,植株基因型组成为2号染色体为Aa,3号染色体为AO。该植株会产生4种基因型的花粉,即AA、AO、Aa、aO,其中aO不育,即产生3种可育基因型的花粉(AA、AO、Aa),具有a基因的花粉占比为$\frac{1}{3}$。该植株雌配子(AA、AO、Aa、aO)均可育,其自交所得到F1的基因型为AAAA:AAAO:AAOO:AAAa:AAaO:AAaa:AaOO:AaaO=1:2:1:2:3:1:1:1。分析图1和图2的电泳结果可知,Ⅰ型植株中含有A和a基因,Ⅱ型植株中含有A基因。其中Ⅰ型植株占比为$\frac{2}{3}$。F1中没有检测到仅扩增出600bp条带的植株,其原因为a花粉不育,无法形成纯合aa植株。
(4)①利用基因型为AaEE和AAEe的植株进行杂交,筛选出F1中AaEe植株(双杂合)。若E/e和A/a连锁且无交换,F2中无同时含A和E的配子(花粉或种子致死),正常植株占比为0。若两基因独立遗传,F1植株(AaEe)产生雌配子为AE:Ae:aE:ae=1:1:1:1,均可育,而雄配子AE:Ae=1;1,aE和ae不可育,利用棋盘法可知,F2为AAEE:AAEe:AaEE:AaEe=1:2:1:2,其中只有AAEE的花粉和自交所结种子均发育正常,即正常植株(AAEE)占比为$\frac{1}{6}$。其他可能:若基因连锁但发生交换,正常植株占比介于0~$\frac{1}{6}$。
故答案为:
(1)替换
(2)父本     $\frac{1}{2}$
(3)3     $\frac{1}{3}$     $\frac{2}{3}$      a花粉不育,无法形成纯合aa植株(4)AaEe        E/e和A/a连锁且无交换,F2中无同时含A和E的配子         $\frac{1}{6}$         若基因连锁但发生交换,正常植株占比介于0~$\frac{1}{6}$

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