题目
对核酸进行加热变性,温度升高到一定程度,核酸溶液的紫外光吸收开始增强;继续升温,在一个较小的温度范围内,光吸收值达到最大值。一般将核酸加热变性中紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为核酸的 ( )A. 退火温度B. 解旋温度C. 复性温度D. 解链温度E. 杂交温度
对核酸进行加热变性,温度升高到一定程度,核酸溶液的紫外光吸收开始增强;继续升温,在一个较小的温度范围内,光吸收值达到最大值。一般将核酸加热变性中紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为核酸的 ( )
A. 退火温度
B. 解旋温度
C. 复性温度
D. 解链温度
E. 杂交温度
题目解答
答案
D. 解链温度
解析
本题考查核酸变性过程中温度与紫外光吸收值变化的关系,关键在于理解解链温度(Tm值)的定义。
核心思路:核酸变性时,双链DNA解链为单链,紫外吸收值增加。当温度达到使50%的双链解链时,对应的温度即为解链温度。需区分其他选项中与温度相关的术语(如退火温度、复性温度等)的定义差异。
核酸变性的光吸收特性
- 双链→单链:加热使双链DNA解链,单链DNA的紫外吸收值高于双链。
- 吸收值变化:
- 初始阶段:温度较低,解链不明显,吸收值逐渐上升。
- 快速变化期:在较小温度范围内,吸收值迅速达到最大值(所有双链解链)。
- 关键点:吸收值达到最大值的50%时的温度,对应一半双链解链,即解链温度(Tm值)。
选项辨析
- 解链温度(D):核酸双链解链50%时的温度,符合题干描述。
- 退火温度(A):PCR中复性引物的温度,与解链无关。
- 复性温度(C):DNA单链重新配对的温度,属于复性过程。
- 解旋温度(B):非标准术语,与解链温度混淆。
- 杂交温度(E):核酸探针杂交的条件,与变性无关。