题目
用于筛选含有重组质粒的宿主细胞,最常用的方法是()A. 测序验证B. 抗生素抗性筛选C. 核酸杂交D. 蛋白免疫印迹
用于筛选含有重组质粒的宿主细胞,最常用的方法是()
A. 测序验证
B. 抗生素抗性筛选
C. 核酸杂交
D. 蛋白免疫印迹
题目解答
答案
B. 抗生素抗性筛选
解析
本题考查筛选含有重组质粒的宿主细胞的常用方法,解题思路是对每个选项所涉及的方法进行分析,判断其是否为筛选含有重组质粒的宿主细胞最常用的方法。
- A选项:测序验证
测序验证是一种非常准确的检测方法,它可以确定DNA序列的具体信息。然而,测序验证操作复杂、成本高,通常用于对已经初步筛选出来的阳性克隆进行进一步的精确鉴定,而不是作为最常用的初步筛选方法。 - B选项:抗生素抗性筛选
在构建重组质粒时,通常会将抗生素抗性基因与目的基因一起连接到载体上。当重组质粒导入宿主细胞后,含有重组质粒的宿主细胞就会获得相应的抗生素抗性。将这些宿主细胞接种在含有相应抗生素的培养基上,只有含有重组质粒的细胞才能在这种含有抗生素的环境中生长,而未导入重组质粒的细胞则会被抑制生长。这种方法操作简单、成本低、效率高,是筛选含有重组质粒的宿主细胞最常用的方法。 - C选项:核酸杂交
核酸杂交是基于核酸分子碱基互补配对的原理,用于检测特定核酸序列的存在。它可以用于检测重组质粒中是否含有目的基因,但操作相对复杂,需要制备探针等,一般不作为最常用的筛选方法。 - D选项:蛋白免疫印迹
蛋白免疫印迹是一种检测蛋白质的方法,它主要用于检测目的基因是否在宿主细胞中表达出相应的蛋白质。而在筛选含有重组质粒的宿主细胞时,首先要确定细胞中是否含有重组质粒,而不是直接检测蛋白质的表达,所以蛋白免疫印迹不是筛选含有重组质粒的宿主细胞的常用方法。