从一种植物叶中得到了粗细胞提取液 , 每 ml 含蛋白质 32mg, 在提取条件下 ,10 u l 提取液的催化反应速率为 0.14 u mol/min, 取 50ml 提取液 , 用硫酸铵盐析分析 , 将饱和度 0.3~0.6 的沉淀物 , 再溶于 10ml 水中 , 此溶液的蛋白质浓度为 50mg/ml. 从中取出 10ml, 测定其反应速度为 0.65mol/min 。 计算 :(1) 提取过程中 , 酶的回收百分率 ; (2) 酶的提纯倍数

本题主要考查酶的回收百分率和提纯倍数的计算。解题的关键在于明确回收百分率是指盐析后酶的活性占初始酶活性的百分比，提纯倍数是指盐析后酶的比活力与初始酶比活力的比值。

（1）计算提取过程中酶的回收百分率

• 步骤一：计算初始酶的总活性
  已知每$ml$粗细胞提取液含蛋白质$32mg$，$10\mu l$提取液的催化反应速率为$0.14\mu mol/min$。
  先将$10\mu l$换算为$0.01ml$，那么$50ml$粗细胞提取液的总活性为：
  $\frac{0.14\mu mol/min}{0.01ml}×50ml = 700\mu mol/min$
• 步骤二：计算盐析后酶的总活性
  盐析后沉淀物溶于$10ml$水中，蛋白质浓度为$50mg/ml$，从中取出$10\mu l$（换算为$0.01ml$）测定其反应速度为$0.65\mu mol/min$。
  则盐析后$10ml$溶液的总活性为：
  $\frac{0.65\mu mol/min}{0.01ml}×10ml = 650\mu mol/min$
• 步骤三：计算酶的回收百分率
  酶的回收百分率 = $\frac{盐析后酶的总活性}{初始酶的总活性}×100\%$，即：
  $\frac{650\mu mol/min}{700\mu mol/min}×100\% \approx 93\%$

（2）计算酶的提纯倍数

• 步骤一：计算初始酶的比活力
  初始酶的比活力 = $\frac{初始酶的活性}{初始蛋白质含量}$，$10\mu l$（$0.01ml$）提取液含蛋白质$32mg/ml×0.01ml = 0.32mg$，活性为$0.14\mu mol/min$。
  所以初始酶的比活力为：
  $\frac{0.14\mu mol/min}{0.32mg} = 0.4375\mu mol/(min·mg)$
• 步骤二：计算盐析后酶的比活力
  盐析后$10\mu l$（$0.01ml$）溶液含蛋白质$50mg/ml×0.01ml = 0.5mg$，活性为$0.65\mu mol/min$。
  则盐析后酶的比活力为：
  $\frac{0.65\mu mol/min}{0.5mg} = 1.3\mu mol/(min·mg)$
• 步骤三：计算酶的提纯倍数
  酶的提纯倍数 = $\frac{盐析后酶的比活力}{初始酶的比活力}$，即：
  $\frac{1.3\mu mol/(min·mg)}{0.4375\mu mol/(min·mg)} = 3$倍