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题目

PCR产物具有特异性是因为( )A. Taq DNA酶保证了产物的特异性B. 合适的变性,退火,延伸温度C. 选择特异性的引物D. 引物的Tm值不同.

PCR产物具有特异性是因为( )

A. Taq DNA酶保证了产物的特异性

B. 合适的变性,退火,延伸温度

C. 选择特异性的引物

D. 引物的Tm值不同.

题目解答

答案

C. 选择特异性的引物

解析

PCR产物的特异性由引物的序列决定。引物是根据目标DNA序列设计的短链,必须与模板链完全互补才能正确退火并指导扩增。其他因素(如温度控制、酶活性)影响反应效率,但引物的特异性是核心。

选项分析

A. Taq DNA酶保证了产物的特异性

Taq酶的作用是延伸DNA链,但其功能依赖于引物的正确退火。若引物非特异性结合,Taq酶会错误扩增,因此酶本身不决定特异性。

B. 合适的变性、退火、延伸温度

温度控制影响反应效率,例如退火温度过高可能导致引物无法结合,但温度仅优化反应条件,非特异性根本原因。

C. 选择特异性的引物

引物的序列必须与目标DNA完全匹配,确保仅在目标区域退火并扩增。这是PCR特异性的直接决定因素。

D. 引物的Tm值不同

Tm值影响退火温度设置,但Tm值本身不赋予特异性。即使Tm值合适,若序列不匹配仍无法正确结合。

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