题目
PCR产物具有特异性是因为( )A. Taq DNA酶保证了产物的特异性B. 合适的变性,退火,延伸温度C. 选择特异性的引物D. 引物的Tm值不同.
PCR产物具有特异性是因为( )
A. Taq DNA酶保证了产物的特异性
B. 合适的变性,退火,延伸温度
C. 选择特异性的引物
D. 引物的Tm值不同.
题目解答
答案
C. 选择特异性的引物
解析
PCR产物的特异性由引物的序列决定。引物是根据目标DNA序列设计的短链,必须与模板链完全互补才能正确退火并指导扩增。其他因素(如温度控制、酶活性)影响反应效率,但引物的特异性是核心。
选项分析
A. Taq DNA酶保证了产物的特异性
Taq酶的作用是延伸DNA链,但其功能依赖于引物的正确退火。若引物非特异性结合,Taq酶会错误扩增,因此酶本身不决定特异性。
B. 合适的变性、退火、延伸温度
温度控制影响反应效率,例如退火温度过高可能导致引物无法结合,但温度仅优化反应条件,非特异性根本原因。
C. 选择特异性的引物
引物的序列必须与目标DNA完全匹配,确保仅在目标区域退火并扩增。这是PCR特异性的直接决定因素。
D. 引物的Tm值不同
Tm值影响退火温度设置,但Tm值本身不赋予特异性。即使Tm值合适,若序列不匹配仍无法正确结合。