题目
PCR反应3个步骤依次为( )。A. 延伸、退火、变性B. 退火、延伸、变性C. 变性、延伸、复性D. 延伸、变性、退火E. 变性、退火、延伸
PCR反应3个步骤依次为( )。
A. 延伸、退火、变性
B. 退火、延伸、变性
C. 变性、延伸、复性
D. 延伸、变性、退火
E. 变性、退火、延伸
题目解答
答案
E. 变性、退火、延伸
解析
PCR反应是扩增特定DNA片段的核心技术,其核心步骤包括变性、退火、延伸三个阶段。
- 变性:高温(90-98℃)使DNA双链解旋为单链,为后续步骤提供模板。
- 退火:低温(40-70℃)使引物与单链DNA结合,形成互补配对。
- 延伸:适宜温度(72℃)下,Taq酶催化dNTP延伸,生成新的互补链。
关键点:步骤顺序严格遵循“变性→退火→延伸”,需注意术语的准确性(如“退火”而非“复性”)。
PCR反应的三个步骤需按以下顺序进行:
- 变性:双链DNA在高温下解链,形成单链模板。
- 退火:温度降低,引物与单链DNA结合,形成局部双链区域。
- 延伸:Taq酶在恒定温度下催化脱氧核苷酸连接,完成新链的合成。
选项分析:
- E(变性、退火、延伸):正确顺序,符合PCR循环逻辑。
- 其他选项均存在步骤顺序错误(如退火与延伸颠倒,或包含非标准术语“复性”)。