题目
【单选题】在 Southern 印迹中常用的核酸变性剂是A. 甲醛B. 乙醛C. 氢氧化钠D. 碳酸钠E. 盐酸
【单选题】在 Southern 印迹中常用的核酸变性剂是
A. 甲醛
B. 乙醛
C. 氢氧化钠
D. 碳酸钠
E. 盐酸
题目解答
答案
C. 氢氧化钠
解析
Southern印迹是分子生物学中用于检测特定DNA序列的经典技术,其核心步骤包括核酸变性。变性的目的是将双链DNA解旋为单链,便于后续转移和探针杂交。
关键知识点:
- 变性剂的作用是破坏DNA的双螺旋结构,常用强碱(如氢氧化钠)通过改变pH值使磷酸二酯键断裂。
- 区分其他试剂:甲醛常用于固定,盐酸用于RNA变性,而氢氧化钠是DNA变性的经典选择。
选项分析
- A. 甲醛:主要用于固定细胞或组织,非变性剂。
- B. 乙醛:无直接作用于DNA变性。
- C. 氢氧化钠:强碱性,通过破坏磷酸二酯键使DNA解链,是Southern印迹中标准变性剂。
- D. 碳酸钠:碱性较弱,非常用试剂。
- E. 盐酸:酸性条件下可能用于RNA变性,但DNA变性需碱性环境。
结论:氢氧化钠(选项C)是Southern印迹中常用的核酸变性剂。