题目
逆转录PCR扩增最终产物的特异性由()A. 随机引物决定B. oligo.d(T)决定C. 逆转录酶决定D. 扩增效率决定E. PCR扩增的特异引物决定
逆转录PCR扩增最终产物的特异性由()
A. 随机引物决定
B. oligo.d(T)决定
C. 逆转录酶决定
D. 扩增效率决定
E. PCR扩增的特异引物决定
题目解答
答案
E. PCR扩增的特异引物决定
解析
逆转录PCR的最终产物特异性由PCR扩增阶段的引物决定。虽然逆转录过程中的引物(如随机引物或oligo.d(T))会影响cDNA的生成范围,但PCR的特异性引物通过与目标序列互补配对,确保扩增产物的精准性。其他因素如逆转录酶或扩增效率不影响最终产物的特异性。
逆转录PCR包含两个关键步骤:
- 逆转录:利用随机引物或oligo.d(T)合成cDNA。
- PCR扩增:通过特异性引物扩增目标cDNA片段。
最终产物的特异性取决于PCR引物的序列。引物需与目标cDNA序列精确匹配,确保扩增的片段唯一且特异。即使逆转录生成多种cDNA,正确设计的引物仍能选择性扩增目标区域。