根据下面的分离原理示意图,可以判断是 () 方-|||-法。-|||-上清液-|||-(可溶性成份)-|||-100,000g,3小时-|||-上清液-|||-10,000g,10分钟-|||-上清液 沉淀-|||-(核糖核蛋白体)-|||-已破碎的 500g,10分钟 沉淀-|||-细胞匀浆 (细胞膜碎片、线粒体、溶酶体)-|||-沉淀-|||-(细胞核)-|||-A.高速冷冻离心法-|||-B.差速离心法-|||-C.区带离心法-|||-D.密度梯度离心法

本题考查离心法的类型及其应用。关键在于理解不同离心方法的原理和应用场景：

• 差速离心法通过逐步提高离心速度，将细胞匀浆中不同大小的结构分步沉淀，常用于分离细胞器。
• 密度梯度离心法利用密度梯度介质，使物质按密度分布；区带离心法则用于分离沉降系数接近的物质。
• 高速冷冻离心法通常用于高速条件下分离特定组分。

题目示意图中通过不同离心速度分步处理，最终分离出细胞核、细胞器等结构，符合差速离心法的核心特征。

图示分析

1. 第一次离心（500g，10分钟）

   • 沉淀：细胞核（较大结构最先沉淀）
   • 上清液：含细胞膜碎片、线粒体、溶酶体等较小结构

2. 第二次离心（10,000g，10分钟）

   • 沉淀：线粒体、溶酶体（中等大小细胞器）
   • 上清液：含更小的颗粒（如核糖体）

3. 第三次离心（100,000g，3小时）

   • 沉淀：核糖体（最小的细胞器）
   • 上清液：可溶性成分（如蛋白质、酶）

方法判断

• 差速离心法的核心是逐步提高离心速度，通过不同转速分步收集沉淀，分离大小不同的细胞器。
• 其他选项中：
  • 密度梯度离心法需密度梯度介质，图中未体现；
  • 区带离心法用于分离同质组分，与细胞器分离无关；
  • 高速冷冻离心法通常用于高速条件下的特定分离，非分步处理。