题目
5'RACE下游引物序列设计是( )A. 加接头的序列B. 编码区序列C. 核心序列的一段D. 核心片段序列一段的反向互补序列
5'RACE下游引物序列设计是( )
A. 加接头的序列
B. 编码区序列
C. 核心序列的一段
D. 核心片段序列一段的反向互补序列
题目解答
答案
C. 核心序列的一段
解析
本题考查5'RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)下游引物序列设计的相关知识。解题的关键在于理解5'RACE技术的原理以及下游引物在其中的作用。
5'RACE技术是用于获取cDNA 5'端序列的方法。其基本原理是先将mRNA反转录成cDNA,然后在cDNA的5'端加上特定的接头序列,接着通过两轮PCR扩增来获得5'端的未知序列。
在5'RACE的两轮PCR中,下游引物起着重要作用。第一轮PCR的下游引物是根据已知的cDNA核心序列设计的,它与已知的cDNA序列特异性结合,引导DNA聚合酶从已知序列向5'端未知序列进行扩增。
下面对每个选项进行分析:
- A选项:加接头的序列通常是用于设计上游引物,而不是下游引物。上游引物与加在cDNA 5'端的接头序列结合,从而能够扩增出包含5'端未知序列的片段,所以A选项错误。
- B选项:编码区序列范围较广,5'RACE主要关注的是cDNA 5'端的未知序列,下游引物是基于核心序列设计,并非整个编码区序列,所以B选项错误。
- C选项:如前面原理所述,5'RACE下游引物是根据核心序列的一段设计的,这样可以保证引物与已知的cDNA序列特异性结合,引导扩增反应向5'端进行,所以C选项正确。
- D选项:下游引物是与已知的cDNA序列正向结合,而不是反向互补序列,所以D选项错误。