题目
通常用来鉴定核酸样品纯度的指标是( )。A. 260nm/280nm吸光度比值B. Tm值大小C. DNA变性所需要的时间D. 样品中GC含量
通常用来鉴定核酸样品纯度的指标是( )。
A. 260nm/280nm吸光度比值
B. Tm值大小
C. DNA变性所需要的时间
D. 样品中GC含量
题目解答
答案
A. 260nm/280nm吸光度比值
解析
考查要点:本题主要考查学生对核酸纯度鉴定方法的理解,特别是分光光度法的应用。
解题核心思路:核酸(DNA或RNA)的纯度通常通过检测其特征性吸光值来判断。关键点在于不同生物分子在紫外区的吸收峰差异:核酸在260nm处有强吸收,而蛋白质在280nm处有吸收。A260/A280比值是判断是否存在蛋白质污染的重要指标。
破题关键:明确各选项的生物学意义,排除与纯度无关的干扰项(如Tm值、变性时间、GC含量等)。
A. 260nm/280nm吸光度比值
核酸(DNA或RNA)的纯度检测常用分光光度法。
- 纯DNA的A260/A280比值约为1.8,纯RNA的比值约为2.0。
- 若比值显著偏离理论值,说明可能存在蛋白质污染(蛋白质在280nm处有吸收,导致比值下降)或酚类等杂质干扰(可能影响260nm吸收)。
B. Tm值大小
Tm值(解链温度)反映核酸的稳定性和GC含量(GC配对多,氢键多,Tm值高),与纯度无关。
C. DNA变性所需要的时间
变性时间受温度、pH等因素影响,无法直接反映纯度。
D. 样品中GC含量
GC含量是核酸的组成特征,与纯度无关。
结论:A选项是唯一直接用于鉴定核酸纯度的指标。