14．对分子量相同而电荷不同的蛋白质分离宜采用的电泳技术为A. 醋酸纤维薄膜电泳B. 琼脂糖凝胶电泳C. 转移电泳D. 等电聚焦电泳E. SDS PAGE

本题考查不同电泳技术的特点及适用情况，解题思路是分析每个选项中电泳技术的原理和适用范围，判断哪种技术适合分离分子量相同而电荷不同的蛋白质。

• A选项：醋酸纤维薄膜电泳
  • 原理：以醋酸纤维薄膜为支持物，利用蛋白质在电场中向与其所带电荷相反的电极移动的特性进行分离。
  • 适用范围：主要用于血清蛋白等的分离，它对蛋白质的分离主要基于蛋白质所带电荷的差异，但对于分子量相同而电荷差异较小的蛋白质分离效果不佳。
• B选项：琼脂糖凝胶电泳
  • 原理：琼脂糖凝胶具有多孔性，蛋白质在电场中通过凝胶的孔隙进行迁移，其迁移速度与蛋白质的分子量、形状等有关。
  • 适用范围：常用于核酸的分离和分析，对于蛋白质的分离，它对分子量的分辨能力较强，但对于电荷差异的分辨能力相对较弱，不适合分离分子量相同而电荷不同的蛋白质。
• C选项：转移电泳
  • 原理：将凝胶电泳分离后的蛋白质转移到固相支持物（如硝酸纤维素膜等）上，以便进行后续的检测和分析。
  • 适用范围：主要用于蛋白质的检测和分析，而不是用于蛋白质的分离，所以该选项不符合要求。
• D选项：等电聚焦电泳
  • 原理：在电场中，蛋白质会向其等电点（pI）的位置移动，当蛋白质到达等电点时，其净电荷为零，不再移动。不同蛋白质具有不同的等电点，因此可以根据等电点的差异进行分离。
  • 适用范围：非常适合分离分子量相同而电荷不同（即等电点不同）的蛋白质，因为它能够精确地根据蛋白质的等电点进行分离，所以该选项正确。
• E选项：SDS - PAGE
  • 原理：SDS（十二烷基硫酸钠）是一种阴离子去污剂，它能与蛋白质结合，使蛋白质带上大量的负电荷，并且使蛋白质的形状变得均一。在电场中，蛋白质的迁移速度主要取决于其分子量大小。
  • 适用范围：主要用于蛋白质分子量的测定和分离，对于分子量相同的蛋白质，由于它们在SDS作用下所带电荷和形状基本相同，无法根据电荷差异进行分离，所以该选项不符合要求。