能测定蛋白质含量的方法有: A. 考马斯亮蓝法B. 双缩脲法C. 凯氏定氮法D. 紫外吸收法

本题考查蛋白质含量测定的常用方法。关键点在于掌握不同方法的原理及应用场景：

1. 双缩脲法：基于肽键与铜离子形成紫色络合物，适用于较纯的蛋白质。
2. 凯氏定氮法：通过测定氮含量推算蛋白质含量，常用于食品中粗蛋白的测定。
3. 考马斯亮蓝法：利用染料与蛋白质结合后颜色变化，灵敏度高，适合低浓度样本。
4. 紫外吸收法：依赖蛋白质在280nm处的特征吸收，操作简便但易受干扰。

各选项分析

A. 考马斯亮蓝法

考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后，溶液从棕红色变为蓝色，通过分光光度计测定吸光值计算浓度。灵敏度高，操作快速，广泛用于实验室。

B. 双缩脲法

在碱性环境下，蛋白质的肽键与Cu²⁺生成紫红色络合物，颜色深浅与蛋白质浓度相关。经典且经济，但需注意干扰物质的影响。

C. 凯氏定氮法

通过硫酸消化样品释放氮，再用碱性蒸馏回收氨并滴定，最后计算蛋白质含量。步骤繁琐但结果可靠，常用于食品工业。

D. 紫外吸收法

蛋白质中芳香族氨基酸（如酪氨酸、色氨酸）在280nm处有特征吸收。操作简单，但需样本纯度高，否则易受干扰（如DNA或酚类物质）。