题目
质粒提出与鉴定实验中纯化质粒的技术是A. 离心技术B. 电泳技术C. 树脂离子交换层析技术D. PCR技术
质粒提出与鉴定实验中纯化质粒的技术是
A. 离心技术
B. 电泳技术
C. 树脂离子交换层析技术
D. PCR技术
题目解答
答案
C. 树脂离子交换层析技术
解析
本题考查质粒提取与鉴定实验中纯化质粒的关键技术。核心思路在于理解不同实验步骤所采用的方法及其作用。质粒纯化需去除宿主细胞DNA和蛋白质等杂质,树脂离子交换层析技术利用DNA分子的电荷特性,在不同离子强度下选择性吸附和洗脱,从而实现纯化。其他选项如离心、电泳、PCR均不直接用于纯化过程。
质粒提取与鉴定实验中,纯化质粒的步骤通常包括以下关键点:
- 裂解细胞:释放质粒DNA。
- 去除蛋白质:通过酶解或化学方法去除蛋白质杂质。
- 纯化质粒DNA:树脂离子交换层析技术在此阶段应用。质粒DNA因带负电荷,会吸附在离子交换树脂上。通过调整溶液中盐离子浓度,低盐时质粒DNA吸附,高盐时洗脱,从而去除小分子杂质和宿主DNA,达到纯化目的。
其他选项分析:
- A. 离心技术:用于初步分离细胞碎片和上清液,但无法纯化质粒。
- B. 电泳技术:用于检测DNA纯度和大小,而非纯化。
- D. PCR技术:用于扩增特定DNA片段,与纯化无关。