题目
DNA自动化测序技术中,不正确的荧光标记方法 ( 难度:1)A. 用荧光染料标记引物5'端B. 用荧光染料标记引物3'-OHC. 用荧光染料标记终止物D. 使用一种或四种不同荧光染料标记E. 使荧光染料标记的核苷酸掺入到新合成的DNA链中
DNA自动化测序技术中,不正确的荧光标记方法 ( 难度:1)
A. 用荧光染料标记引物5'端
B. 用荧光染料标记引物3'-OH
C. 用荧光染料标记终止物
D. 使用一种或四种不同荧光染料标记
E. 使荧光染料标记的核苷酸掺入到新合成的DNA链中
题目解答
答案
B. 用荧光染料标记引物3'-OH
解析
步骤 1:理解荧光标记方法
荧光标记方法在DNA测序中用于标记引物或终止物,以便在测序过程中通过荧光信号来识别特定的核苷酸。标记方法包括标记引物的5'端、标记终止物、使用不同荧光染料标记、以及使荧光染料标记的核苷酸掺入到新合成的DNA链中。
步骤 2:分析选项
A. 用荧光染料标记引物5'端:这是正确的标记方法,因为标记引物的5'端可以用于追踪新合成的DNA链。
B. 用荧光染料标记引物3'-OH:这是不正确的标记方法,因为引物的3'-OH端是用于DNA合成的活性位点,标记它会干扰DNA合成过程。
C. 用荧光染料标记终止物:这是正确的标记方法,因为标记终止物可以用于识别特定的核苷酸。
D. 使用一种或四种不同荧光染料标记:这是正确的标记方法,因为使用不同荧光染料可以区分不同的核苷酸。
E. 使荧光染料标记的核苷酸掺入到新合成的DNA链中:这是正确的标记方法,因为标记的核苷酸可以用于追踪新合成的DNA链。
步骤 3:确定不正确的荧光标记方法
根据以上分析,选项B是不正确的荧光标记方法,因为标记引物的3'-OH端会干扰DNA合成过程。
荧光标记方法在DNA测序中用于标记引物或终止物,以便在测序过程中通过荧光信号来识别特定的核苷酸。标记方法包括标记引物的5'端、标记终止物、使用不同荧光染料标记、以及使荧光染料标记的核苷酸掺入到新合成的DNA链中。
步骤 2:分析选项
A. 用荧光染料标记引物5'端:这是正确的标记方法,因为标记引物的5'端可以用于追踪新合成的DNA链。
B. 用荧光染料标记引物3'-OH:这是不正确的标记方法,因为引物的3'-OH端是用于DNA合成的活性位点,标记它会干扰DNA合成过程。
C. 用荧光染料标记终止物:这是正确的标记方法,因为标记终止物可以用于识别特定的核苷酸。
D. 使用一种或四种不同荧光染料标记:这是正确的标记方法,因为使用不同荧光染料可以区分不同的核苷酸。
E. 使荧光染料标记的核苷酸掺入到新合成的DNA链中:这是正确的标记方法,因为标记的核苷酸可以用于追踪新合成的DNA链。
步骤 3:确定不正确的荧光标记方法
根据以上分析,选项B是不正确的荧光标记方法,因为标记引物的3'-OH端会干扰DNA合成过程。