题目
常用核酸定性和定量检测方法是(1.0)A. 测磷酸法B. 与标准核酸分光比色法C. 260nm紫外分光光度法D. 测核糖法E. 定氮法
常用核酸定性和定量检测方法是(1.0)
A. 测磷酸法
B. 与标准核酸分光比色法
C. 260nm紫外分光光度法
D. 测核糖法
E. 定氮法
题目解答
答案
C. 260nm紫外分光光度法
解析
本题考查核酸定性和定量检测方法的相关知识。解题思路是对每个选项所涉及的方法进行分析,判断其是否为常用的核酸定性和定量检测方法。
- A选项:测磷酸法:核酸中含有磷酸,但通过测磷酸法来检测核酸,操作复杂且特异性不强,因为生物体内还有其他含磷酸的物质,所以它不是常用的核酸定性和定量检测方法。
- B选项:与标准核酸分光比色法:这种方法虽然可以用于核酸定量,但需要有标准核酸作为对照,操作相对繁琐,且标准核酸的制备和保存也有一定要求,不是最常用的方法。
- C选项:260nm紫外分光光度法:核酸分子中的嘌呤和嘧啶碱基具有共轭双键,在260nm波长处有特征性的吸收峰。通过测量样品在260nm处的吸光度(A₂₆₀),可以根据朗伯 - 比尔定律$A = \varepsilon cl$(其中$A$为吸光度,$\varepsilon$为摩尔吸光系数,$c$为物质的量浓度,$l$为光程)来计算核酸的含量。同时,还可以通过$A_{260}/A_{280}$的比值来判断核酸的纯度,所以260nm紫外分光光度法是常用的核酸定性和定量检测方法。
- D选项:测核糖法:核酸中的核糖可以通过一些化学方法进行检测,但这种方法特异性较差,且操作复杂,不是常用的核酸检测方法。
- E选项:定氮法:定氮法主要用于测定蛋白质等含氮化合物的含量,因为核酸中氮含量相对较低,且定氮法不能特异性地检测核酸,所以不是核酸的常用检测方法。