蛙心灌流操作的正确方法是A. 颈总动脉穿1根线,主动脉干穿2根线B. 用剪刀破坏牛蛙的脊髓C. 用线剪剪开心包膜并分离D. 用毁髓针破坏牛蛙的大脑E. 充分游离两侧动脉,钝性分离包膜

本题考查蛙心灌流实验的操作步骤，核心在于理解实验中关键操作的正确顺序和方法。解题需明确：

1. 破坏中枢神经系统的正确部位（脊髓而非大脑）；
2. 心包膜处理方式（钝性分离而非剪开）；
3. 动脉处理原则（充分游离避免损伤）。

选项分析

• A. 颈总动脉穿1根线，主动脉干穿2根线
  错误。蛙心灌流需结扎主动脉和肺动脉，但颈总动脉通常不参与灌流操作。

• B. 用剪刀破坏牛蛙的脊髓
  正确操作，但非本题考查重点。破坏脊髓可消除神经反射，但题目正确答案为E，故非最优选项。

• C. 用线剪剪开心包膜并分离
  错误。心包膜应通过钝性分离（如用玻璃分针）而非剪开，避免损伤心脏。

• D. 用毁髓针破坏牛蛙的大脑
  错误。破坏大脑无法彻底消除神经反射，应破坏脊髓。

• E. 充分游离两侧动脉，钝性分离包膜
  正确。钝性分离包膜可减少组织损伤，充分游离动脉利于后续灌流操作。