多选题 分离纯化蛋白质主要依据哪些性质?A. 电荷不同B. 蛋白质溶液的黏度不同C. 分子大小和形状D. 溶解度不同E. 蛋白质等电点
A. 电荷不同
B. 蛋白质溶液的黏度不同
C. 分子大小和形状
D. 溶解度不同
E. 蛋白质等电点
题目解答
答案
A. 电荷不同
C. 分子大小和形状
D. 溶解度不同
E. 蛋白质等电点
解析
本题考查蛋白质分离纯化的依据,解题思路是分析每个选项所涉及的性质是否能用于蛋白质的分离纯化。
选项A
蛋白质是两性电解质,在不同pH溶液中可带正电荷、负电荷或呈电中性。利用蛋白质在电场中向与其所带电荷相反的电极移动的性质,即电泳技术,可以根据蛋白质电荷不同进行分离纯化。例如,在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,不同蛋白质由于所带电荷和分子大小不同,在电场作用下迁移速度不同,从而实现分离。所以选项A正确。
选项B
蛋白质溶液的黏度虽然与蛋白质的分子大小、形状等有关,但黏度的差异相对较小,且难以精确控制和测量,一般不作为蛋白质分离纯化的主要依据。所以选项B错误。
选项C
根据蛋白质分子大小和形状的不同,可以采用凝胶过滤层析等方法进行分离。凝胶过滤层析的固定相是具有一定孔径的凝胶颗粒,当蛋白质溶液通过凝胶柱时,分子大小不同的蛋白质在凝胶颗粒中的扩散和排阻情况不同。大分子蛋白质不能进入凝胶颗粒内部,直接随洗脱液流出;小分子蛋白质可以进入凝胶颗粒内部,洗脱速度较慢,从而实现不同大小蛋白质的分离。所以选项C正确。
选项D
蛋白质的溶解度受多种因素影响,如pH、离子强度、温度等。利用蛋白质在不同条件下溶解度的差异,可以通过盐析、有机溶剂沉淀等方法进行分离纯化。例如,盐析法是向蛋白质溶液中加入大量中性盐,使蛋白质的溶解度降低而沉淀析出,不同蛋白质在不同盐浓度下的溶解度不同,从而达到分离的目的。所以选项D正确。
选项E
蛋白质等电点是指蛋白质在某一pH溶液中,所带正、负电荷相等,净电荷为零,此时蛋白质的溶解度最小。利用蛋白质等电点的不同,可以通过调节溶液的pH至不同蛋白质的等电点,使蛋白质沉淀,从而实现分离。例如,在等电点沉淀法中,将溶液pH调节到目标蛋白质的等电点,使该蛋白质沉淀,而其他蛋白质仍溶解在溶液中,进而实现分离。所以选项E正确。