题目
[单选] 能测定蛋白质分子量的电泳技术为()A. 醋酸纤维薄膜电泳B. 琼脂糖凝胶电泳C. 滤纸电泳D. 等点聚焦电泳E. SDS-PAGE
[单选] 能测定蛋白质分子量的电泳技术为()
A. 醋酸纤维薄膜电泳
B. 琼脂糖凝胶电泳
C. 滤纸电泳
D. 等点聚焦电泳
E. SDS-PAGE
题目解答
答案
E. SDS-PAGE
解析
本题考查电泳技术的分类及应用,核心在于理解不同电泳方法的分离原理及其适用场景。
关键点:
- SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)通过消除蛋白质原有电荷差异(SDS结合使蛋白质带相同负电荷)和分子筛效应(聚丙烯酰胺凝胶的孔径大小分离蛋白质),实现按分子量分离,迁移率与分子量呈线性关系,因此能直接测定蛋白质分子量。
- 其他选项如琼脂糖凝胶电泳、等点聚焦电泳等,主要针对核酸分离或等电点差异,无法精确测定蛋白质分子量。
选项分析
A. 醋酸纤维薄膜电泳
- 优点:分辨率高,适合分离小分子物质(如氨基酸)。
- 局限:无法直接测定分子量,需结合其他方法(如比活性分析)。
B. 琼脂糖凝胶电泳
- 主要用于DNA分离(如核酸片段大小分析)。
- 蛋白质分离效果有限,无法精确测定分子量。
C. 滤纸电泳
- 分离能力较弱,常用于教学或简单分离场景。
- 无法测定分子量。
D. 等点聚焦电泳
- 根据蛋白质等电点分离,适用于分离同工酶或等电点不同的蛋白质。
- 与分子量无关,无法测定分子量。
E. SDS-PAGE
- SDS作用:使蛋白质完全带负电荷,消除电荷差异。
- 聚丙烯酰胺凝胶:通过孔径大小形成分子筛效应,分离不同分子量的蛋白质。
- 迁移率与分子量线性关系:通过标准蛋白Marker对比,可直接计算待测蛋白分子量。