根据蛋白质两性解离性质及其等电点的不同对蛋白质进行分离纯化的操作技术是A. 用尿素或盐酸胍溶解没有活性的蛋白质(包涵体)B. 聚丙烯酰胺凝胶电泳C. 离子交换层析D. 凝胶过滤层析E. 超滤

本题考查蛋白质分离纯化技术的原理，核心在于理解不同技术如何利用蛋白质的物理化学性质差异。关键点在于：

1. 两性解离性质：蛋白质因含羧基和氨基，在不同pH下带不同电荷。
2. 等电点差异：不同蛋白质的等电点不同，导致在特定pH下电荷状态不同。
3. 技术对应原理：需明确各选项技术的核心分离机制，离子交换层析通过电荷相互作用实现分离，符合题干要求。

选项分析

• A. 用尿素或盐酸胍溶解包涵体
  通过破坏蛋白质空间结构使其溶解，与电荷无关，属于复性处理步骤。

• B. 聚丙烯酰胺凝胶电泳
  主要根据分子量分离，电泳迁移率虽受电荷影响，但凝胶孔径是主导因素。

• C. 离子交换层析
  核心原理：蛋白质在特定pH下带电，与层析柱的离子交换树脂结合。通过调整洗脱液离子强度或pH，使不同电荷状态的蛋白质依次洗脱，直接利用等电点差异。

• D. 凝胶过滤层析
  依据分子大小，大分子因无法进入凝胶孔隙而先流出，与电荷无关。

• E. 超滤
  通过膜的孔径大小截留分子，仅与分子量相关。