基因工程技术中限制酶作用的主要化学键是() A. 氢键B. 磷酸二酯键C. 二硫键D. 肽键

考查要点：本题主要考查基因工程中限制酶的作用机制，需明确限制酶作用的化学键类型。
解题核心：限制酶的作用对象是DNA分子的磷酸二酯键，通过切割磷酸二酯键实现DNA片段的分离。
关键点：

1. 限制酶属于工具酶，用于切割DNA。
2. DNA结构中，磷酸二酯键连接脱氧核糖与磷酸，形成链状骨架。
3. 其他选项（如氢键、二硫键、肽键）分别对应碱基配对、蛋白质结构等，与DNA切割无关。

限制酶的作用机制如下：

1. 识别特定序列：限制酶能识别DNA中的特定短序列（如6 bp序列）。
2. 切割磷酸二酯键：在识别序列的特定位置，切断相邻脱氧核糖之间的磷酸二酯键，使DNA链断裂。
3. 产生黏性末端或平末端：切割方式决定末端类型，便于后续操作（如与载体连接）。

选项分析：

• A. 氢键：维持碱基配对，与限制酶无关。
• B. 磷酸二酯键：正确，限制酶通过切割此键断开DNA链。
• C. 二硫键：属于蛋白质内部结构，与DNA无关。
• D. 肽键：蛋白质中氨基酸连接键，与DNA无关。