在观察植物细胞质壁分离的实验中，发生质壁分离的细胞原生质层和细胞壁之间充满了A. 细胞液B. 蔗糖溶液C. 空气D. 清水

本题考查植物细胞质壁分离实验的相关知识，解题的关键在于理解质壁分离的原理以及各部分结构所处的环境。

在植物细胞质壁分离实验中，通常是将植物细胞置于外界溶液（如蔗糖溶液）中。当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，细胞会失水。

• 细胞失水的过程是：细胞液中的水分会通过原生质层（包括细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质）向外扩散。
• 由于细胞壁具有全透性，蔗糖溶液可以自由通过细胞壁。而原生质层具有选择透过性，蔗糖溶液不能通过原生质层进入细胞内部。
• 随着细胞不断失水，原生质层会逐渐与细胞壁分离，此时原生质层和细胞壁之间的空间就被外界的蔗糖溶液所填充。

而细胞液是存在于液泡中的液体；空气一般不会进入到原生质层和细胞壁之间；清水不符合该实验中外界溶液的情况。