题目
745.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,电泳结束后如何进行染色?
745.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,电泳结束后如何进行染色?
题目解答
答案
【答案】电泳完毕,将电泳槽取出,倒去缓冲液,取下凝胶管,放入培养皿中。用一个带有长针头的注射器,吸满水,将针头沿管壁插入,同时慢慢地将注射器中的水推出,并不断转动凝胶管,将凝胶管挤脱出来,也可用洗耳球挤压。取 0.5ml 联苯胺母液+H2O9.3ml+0.2ml3%H2O2,混匀后倒入盛有凝胶条的培养皿。此时可以看到胶条上出现蓝色或棕褐色环,即过氧化物酶带,约 10min 后用自来水冲洗,这时蓝色带也慢慢变成棕褐色。
解析
步骤 1:准备染色液
在电泳结束后,需要准备染色液。染色液由联苯胺母液、水和过氧化氢(H2O2)组成。具体配比为:0.5ml 联苯胺母液、9.3ml 水和 0.2ml 3%H2O2。将这些成分混合均匀,形成染色液。
步骤 2:取出凝胶
将电泳槽取出,倒去缓冲液。取下凝胶管,放入培养皿中。使用带有长针头的注射器,吸满水,将针头沿管壁插入,同时慢慢地将注射器中的水推出,并不断转动凝胶管,将凝胶管挤脱出来。也可以使用洗耳球挤压。
步骤 3:染色
将制备好的染色液倒入盛有凝胶条的培养皿中。此时可以看到胶条上出现蓝色或棕褐色环,即过氧化物酶带。染色过程大约需要 10 分钟。
步骤 4:冲洗
染色完成后,用自来水冲洗凝胶条,此时蓝色带会慢慢变成棕褐色。
在电泳结束后,需要准备染色液。染色液由联苯胺母液、水和过氧化氢(H2O2)组成。具体配比为:0.5ml 联苯胺母液、9.3ml 水和 0.2ml 3%H2O2。将这些成分混合均匀,形成染色液。
步骤 2:取出凝胶
将电泳槽取出,倒去缓冲液。取下凝胶管,放入培养皿中。使用带有长针头的注射器,吸满水,将针头沿管壁插入,同时慢慢地将注射器中的水推出,并不断转动凝胶管,将凝胶管挤脱出来。也可以使用洗耳球挤压。
步骤 3:染色
将制备好的染色液倒入盛有凝胶条的培养皿中。此时可以看到胶条上出现蓝色或棕褐色环,即过氧化物酶带。染色过程大约需要 10 分钟。
步骤 4:冲洗
染色完成后,用自来水冲洗凝胶条,此时蓝色带会慢慢变成棕褐色。