题目
PCR实验的基本步骤如下:A. 反应混合物被加热到94℃,在该温度下,DNA双螺旋两条链之间的氢键被打断,DNA分子发生变性。B. 反应混合物被冷却到50~70 ℃ , 引物单链与模板 DNA单链退火。C. 接着温度又被升高到了72℃ 。Taq DNA聚合酶开始合成新的双链DNA分子。D. 接下来温度又被升到94 ℃ 。双链DNA分子又变性成为单链,于是便开始了第二轮的循环。
PCR实验的基本步骤如下:
A. 反应混合物被加热到94℃,在该温度下,DNA双螺旋两条链之间的氢键被打断,DNA分子发生变性。
B. 反应混合物被冷却到50~70 ℃ , 引物单链与模板 DNA单链退火。
C. 接着温度又被升高到了72℃ 。Taq DNA聚合酶开始合成新的双链DNA分子。
D. 接下来温度又被升到94 ℃ 。双链DNA分子又变性成为单链,于是便开始了第二轮的循环。
题目解答
答案
ABCD
解析
本题考查PCR实验的基本步骤相关知识。解题思路是依据PCR技术的原理和流程,对每个步骤进行分析,判断其是否符合PCR实验的正确顺序和操作。
详细解析
- 步骤A:
- 在PCR实验中,第一步是将反应混合物加热到94℃。这是因为DNA双螺旋结构是由两条链通过氢键连接而成的,在94℃的高温下,氢键会被打断,使得DNA分子发生变性,从双链状态转变为单链状态,为后续引物与模板结合做准备。所以步骤A是PCR实验的起始步骤,是正确的。
- 步骤B:
- 当DNA分子变性为单链后,需要将反应混合物冷却到50 - 70℃。在这个温度范围内,引物单链能够与模板DNA单链通过碱基互补配对的方式结合,这个过程称为退火。引物的作用是为DNA聚合酶提供起始合成的位点,所以步骤B是PCR实验中连接变性和延伸的重要步骤,是正确的。
- 步骤C:
- 退火完成后,将温度升高到72℃。Taq DNA聚合酶是一种耐高温的DNA聚合酶,它在72℃时具有较高的活性,能够以引物为起点,以四种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对的原则,在模板DNA单链上合成新的双链DNA分子。所以步骤C是PCR实验中进行DNA合成的关键步骤,是正确的。
- 步骤D:
- 一轮PCR循环完成后,为了进行下一轮的循环,需要将温度再次升高到94℃,使新合成的双链DNA分子再次变性成为单链,这样就可以开始第二轮的循环,不断扩增DNA。所以步骤D是实现DNA多次扩增的必要步骤,是正确的。
综上所述,ABCD四个步骤构成了PCR实验的一个完整循环,顺序和操作都是正确的。