某种地中海贫血（TDT） 是严重的单基因病，严重时可能危及生命。人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL1IA蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对TDT患者实行基因治疗。研究人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，可以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。分析回答：你分结构 终止子 荧光蛋白基因 P BCLI1A基因 注:-|||-F1~F7 R:引物-|||-R:绝急素诱导下发挥-|||-Nhe I EcoR I Min I EcoR I Xho I 终止子 作用的心动子-|||-限制前识别序列及切制位点:-|||-Mun I: C'AATTG-|||-调挖序列及口动子 R Xho l:CTCGAG-|||-EcoR 1:GAAITC-|||-→(P2) Sall:G-|||-Xho I Min Nhe I:G'CTAGC-|||-Sall 终止子（1）图中启动子是 ____ 识别和结合位点，绿色荧光蛋白基因作为 ____ 。（2）PCR扩增γ基因上游不同DNA片段的原理是 ____ ，为使PCR反应体系中的模板解链为单链，需要满足的条件是 ____ 。（3）将扩增后的产物定向插入载体指导绿色荧光蛋白基因表达，需要在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在R末端添加的序列所对应的限制酶应为 ____ 。实验中R等引物的作用是 ____ 。（4）从产物扩增到载体构建完成的整个过程中，除限制酶外，还必须用到的工具酶有DNA连接酶和 ____ ，其中前者催化形成的化学键是 ____ 。（5）将构建好的载体成功转化至除去BCLIIA基因的受体细胞中，结果发现，含F1～F6与R扩增产物的受体细胞发出绿色荧光。向培养液中添加适量的雄激素，含F1～F4与R扩增产物的受体细胞荧光消失，而含F5～F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游的调控序列上与引物所对应的位置不含有BCL1IA蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCLIIA 蛋白结合位点位于 ____ 。

某种地中海贫血（TDT） 是严重的单基因病，严重时可能危及生命。人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL1IA蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对TDT患者实行基因治疗。研究人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，可以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。分析回答：

（1）图中启动子是 ____ 识别和结合位点，绿色荧光蛋白基因作为 ____ 。
（2）PCR扩增γ基因上游不同DNA片段的原理是 ____ ，为使PCR反应体系中的模板解链为单链，需要满足的条件是 ____ 。
（3）将扩增后的产物定向插入载体指导绿色荧光蛋白基因表达，需要在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在R末端添加的序列所对应的限制酶应为 ____ 。实验中R等引物的作用是 ____ 。
（4）从产物扩增到载体构建完成的整个过程中，除限制酶外，还必须用到的工具酶有DNA连接酶和 ____ ，其中前者催化形成的化学键是 ____ 。
（5）将构建好的载体成功转化至除去BCLIIA基因的受体细胞中，结果发现，含F1～F6与R扩增产物的受体细胞发出绿色荧光。向培养液中添加适量的雄激素，含F1～F4与R扩增产物的受体细胞荧光消失，而含F5～F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游的调控序列上与引物所对应的位置不含有BCL1IA蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCLIIA 蛋白结合位点位于 ____ 。