题目
对于实时PCR技术而言,下面哪种说法是正确的A. 只需要一对常规引物B. 只需要一对荧光引物C. 只需要一条荧光引物D. 荧光引物结合到DNA链上就可发荧光E. 荧光引物在PCR过程中可被DNA聚合酶切掉
对于实时PCR技术而言,下面哪种说法是正确的
- A. 只需要一对常规引物
- B. 只需要一对荧光引物
- C. 只需要一条荧光引物
- D. 荧光引物结合到DNA链上就可发荧光
- E. 荧光引物在PCR过程中可被DNA聚合酶切掉
题目解答
答案
E.荧光引物在PCR过程中可被DNA聚合酶切掉
解析
本题考查实时PCR技术的核心原理,特别是荧光引物的作用机制。关键点在于理解:
- 实时PCR需要荧光标记的探针或引物来检测扩增过程;
- 荧光信号的释放机制:荧光基团需被DNA聚合酶切割后才能被检测;
- 引物设计原则:常规引物和荧光引物的搭配使用。
选项分析
A. 只需要一对常规引物
错误。实时PCR需要荧光标记的探针或荧光引物配合检测,常规引物无法产生荧光信号。
B. 只需要一对荧光引物
错误。PCR需要两条引物分别结合到DNA的两条链,且通常一条引物带有荧光标记,另一条为普通引物。
C. 只需要一条荧光引物
错误。PCR的基本原理要求两条引物分别结合到模板的两条链,单条荧光引物无法完成扩增。
D. 荧光引物结合到DNA链上就可发荧光
错误。荧光信号的释放需要DNA聚合酶切割荧光基团,仅结合到模板上无法触发荧光。
E. 荧光引物在PCR过程中可被DNA聚合酶切掉
正确。荧光引物的5'端标记荧光基团,3'端被阻断。当DNA聚合酶延伸时,会切割荧光基团并释放荧光信号,这是实时PCR检测的核心机制。