题目
一名技术人员需要从一份EDTA抗凝全血样本中提取高纯度的基因组DNA,用于高灵敏度的病原体PCR检测。他参照的流程包含了核酸分离纯化的四个经典步骤:1. 红细胞裂解液处理白细胞;2. 加入SDS和蛋白酶K消化蛋白质;3. 用RNase A处理去除RNA;4. 加入预冷70%乙醇沉淀DNA,最后用70%乙醇洗涤沉淀。然而,最终得到的DNA沉淀难以重溶,且用于PCR时无扩增信号。请问,在下列对该操作流程的分析中,最可能指出其核心错误的是哪一项?A. 步骤1中,使用红细胞裂解液处理后未充分离心去除血红蛋白残留,这些残留物会抑制后续PCR反应。B. 步骤2中,SDS(十二烷基硫酸钠)与蛋白酶K配合使用,能有效消化与DNA结合的组蛋白,该步骤无误。C. 步骤3中,为获得纯DNA而使用RNase A处理,这会降解DNA样本,导致PCR失败。D. 步骤4中,在沉淀DNA后,使用70%乙醇洗涤是为了去除残留的盐分,该步骤无误。
一名技术人员需要从一份EDTA抗凝全血样本中提取高纯度的基因组DNA,用于高灵敏度的病原体PCR检测。他参照的流程包含了核酸分离纯化的四个经典步骤:1. 红细胞裂解液处理白细胞;2. 加入SDS和蛋白酶K消化蛋白质;3. 用RNase A处理去除RNA;4. 加入预冷70%乙醇沉淀DNA,最后用70%乙醇洗涤沉淀。然而,最终得到的DNA沉淀难以重溶,且用于PCR时无扩增信号。请问,在下列对该操作流程的分析中,最可能指出其核心错误的是哪一项?
A. 步骤1中,使用红细胞裂解液处理后未充分离心去除血红蛋白残留,这些残留物会抑制后续PCR反应。
B. 步骤2中,SDS(十二烷基硫酸钠)与蛋白酶K配合使用,能有效消化与DNA结合的组蛋白,该步骤无误。
C. 步骤3中,为获得纯DNA而使用RNase A处理,这会降解DNA样本,导致PCR失败。
D. 步骤4中,在沉淀DNA后,使用70%乙醇洗涤是为了去除残留的盐分,该步骤无误。
题目解答
答案
D. 步骤4中,在沉淀DNA后,使用70%乙醇洗涤是为了去除残留的盐分,该步骤无误。