双缩脲法测定蛋白质的原理是基于（）A. 肽键与Cu²⁺的紫色络合物B. 氨基酸与茚三酮的蓝色反应C. 苯环结构的紫外吸收D. 蛋白质沉淀反应

双缩脲法测定蛋白质的原理主要考查对蛋白质检测方法的理解。关键点在于明确双缩脲试剂的作用机制：在碱性环境下，蛋白质中的肽键与Cu²⁺形成紫色络合物，颜色深浅与蛋白质含量相关。需区分其他检测方法（如茚三酮反应、紫外吸收法等）的原理，避免混淆。

双缩脲法的核心步骤如下：

1. 碱性条件：在NaOH溶液中，Cu²⁺以Cu(OH)₂形式存在。
2. 肽键络合：蛋白质中的肽键与Cu²⁺结合，生成蓝色→紫色的络合物。
3. 比色定量：通过颜色深浅（通常在可见光区测定吸光度）计算蛋白质浓度。

选项分析：

• A：正确，直接对应双缩脲反应的核心机制。
• B：错误，属于茚三酮试剂的显色反应（需加热）。
• C：错误，苯环的紫外吸收用于其他检测法（如Folin酚法）。
• D：错误，沉淀反应（如硫酸铵盐析）不涉及显色定量。