回答下列（一）、（二）小题：（10分） （一）开发山楂果醋恰好让山楂中的有机酸丰富了果醋的酸味，同时也弥补生食山楂酸味大的缺陷，具体酿制山楂果醋分为以下三个阶段，请将具体过程补充完整。 （1）制备山楂果原汁：选成熟的山楂果，在清水冲洗山楂果 （填“之前”或“之后”）去梗。将山楂果切片并去籽，再添加 ，酶解适宜时间后压榨取果汁。（1分） （2）乙醇发酵：由于山楂果原汁 ，故发酵液中添加适量蔗糖，以获得酒精含量较高的果酒。果汁中加入活化的 后，在适宜环境下发酵一段时间，当发酵液中停止 ，发酵完毕待过滤，或发酵至 ，上清液即为果酒，用虹吸法取出。（2分） （3）醋酸发酵：将醋化醋杆菌进行扩大培养后，经检查菌体生长正常并无杂菌污染后接种于山楂酒-水中进行发酵，整个发酵过程需要通入 。在发酵后期加入食盐，其目的是调味和 ，以防止果醋被发酵分解。（1分） （二）下图为转基因抗虫烟草的培育流程，①②③④表示过程，其中②表示利用农杆菌转入受体细胞。回答下列相关问题： （1）在①过程构建重组质粒时，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，使两者形成粘性末端用于拼接，这种方法的明显缺点是目的基因和质粒 （答出2点即可）。另外，影响拼接效率的主要因素，除以上缺点和盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素外，还有 （答出2点即可）。（1分） （2）在②过程中，将图示重组Ti质粒导入农杆菌时可用 处理农杆菌，以提高转化效率。操作之后，需要特定的培养基对农杆菌进行筛选，其原因是 ，最终筛选到的对象在相应选择培养基上的存活情况是 。（2.5分） （3）在③过程常通过调节 的适当配比，从愈伤组织诱导出芽和根的 ，并由此再生出新植株。获得转基因烟草后，再通过[④] 过程实现多个世代组织培养。（2.5分）