【单选题】获得纯种细菌最简单有效的方法是将标本A. 穿刺接种于半固体培养基中培养B. 研磨接种于液体培养基中培养C. 分区画线接种于固体平板培养基培养D. 连续涂布于固体平板培养基培养E. 蛇形画线接种于固体斜面培养基培养

考查要点：本题主要考查微生物学中获得纯种细菌的基本方法，重点在于区分不同接种技术的原理和应用场景。

解题核心思路：

1. 明确目标：获得纯种的关键是防止杂菌污染，并确保目标菌独立生长。
2. 对比选项：需判断不同接种方法是否能形成单菌落，并分析其操作简便性。
3. 关键知识点：
   • 平板划线法通过多次划线稀释菌液，结合灼烧灭菌，最终在培养基表面形成单菌落。
   • 稀释涂布平板法需多次稀释菌液，步骤较复杂。
   • 其他方法（如穿刺、液体接种）无法直接形成单菌落。

破题关键：

• 固体培养基是分离单菌落的基础（排除液体培养基选项）。
• 分区画线通过逐步稀释和灭菌操作，确保最终区域的菌落纯度（选项C）。

选项分析

选项A：穿刺接种于半固体培养基

• 特点：用于观察细菌的动力（如鞭毛）或分离单菌落。
• 局限：半固体培养基允许细菌在穿刺线周围扩散，难以保证纯种。

选项B：研磨接种于液体培养基

• 特点：液体培养基中细菌悬浮生长，形成菌液。
• 局限：无法区分单菌落，易混杂杂菌。

选项C：分区画线接种于固体平板

• 关键步骤：
  1. 多次灼烧灭菌：每次划线前灼烧接种环，避免杂菌干扰。
  2. 分区稀释：从高密度区域向低密度区域划线，最终在新区域形成单菌落。
• 优势：操作简单，直接形成纯培养。

选项D：连续涂布于固体平板

• 特点：稀释涂布平板法需多次稀释菌液，涂布不同稀释度的样本。
• 局限：步骤较复杂，需精确控制稀释梯度。

选项E：蛇形画线接种于固体斜面

• 特点：固体斜面用于保存菌种，但蛇形画线无法有效稀释菌液，难以分离单菌落。