题目
常用核酸定性和定量检测方法是(1.0)A. 定氮法B. 测磷酸法C. 测核糖法D. 与标准核酸分光比色法E. 260nm紫外分光光度法
常用核酸定性和定量检测方法是(1.0)
A. 定氮法
B. 测磷酸法
C. 测核糖法
D. 与标准核酸分光比色法
E. 260nm紫外分光光度法
题目解答
答案
E. 260nm紫外分光光度法
解析
本题考查核酸定性和定量检测方法的相关知识。解题思路是对每个选项所涉及的方法进行分析,判断其是否为常用的核酸定性和定量检测方法。
- A选项:定氮法
定氮法主要用于测定蛋白质的含量,因为蛋白质中含有氮元素,通过测定样品中的含氮量来推算蛋白质的含量,并非用于核酸的定性和定量检测,所以A选项错误。 - B选项:测磷酸法
虽然核酸中含有磷酸基团,但测磷酸法操作复杂,且容易受到其他含磷酸化合物的干扰,不是常用的核酸定性和定量检测方法,所以B选项错误。 - C选项:测核糖法
测核糖法可以用于区分DNA和RNA,但它不是一种常用的直接对核酸进行定量的方法,操作相对繁琐,所以C选项错误。 - D选项:与标准核酸分光比色法
这种方法需要制备标准核酸溶液,操作较为复杂,且标准核酸的制备和保存有一定难度,不是最常用的方法,所以D选项错误。 - E选项:260nm紫外分光光度法
核酸分子中的嘌呤和嘧啶碱基具有共轭双键,在260nm波长处有特征性的吸收峰。通过测量样品在260nm处的吸光度(A₂₆₀),可以根据朗伯 - 比尔定律$A = \varepsilon cl$(其中$A$为吸光度,$\varepsilon$为摩尔吸光系数,$c$为溶液浓度,$l$为光程)来计算核酸的含量。同时,还可以通过$A_{260}/A_{280}$的比值来判断核酸的纯度,是一种常用且简便的核酸定性和定量检测方法,所以E选项正确。