题目
制备免疫球蛋白 F(ab')2 片段时,选用的酶为A. 胰蛋白酶B. 酸性磷酸酶C. 木瓜蛋白酶D. 碱性磷酸酶E. 胃蛋白酶
制备免疫球蛋白 F(ab')2 片段时,选用的酶为
A. 胰蛋白酶
B. 酸性磷酸酶
C. 木瓜蛋白酶
D. 碱性磷酸酶
E. 胃蛋白酶
题目解答
答案
E. 胃蛋白酶
解析
考查要点:本题主要考查免疫球蛋白的结构及其片段制备所用酶的选择,需明确不同蛋白酶对免疫球蛋白的作用位点。
解题核心思路:
- 免疫球蛋白结构:由两条重链和两条轻链组成,通过二硫键连接。
- F(ab')₂片段特点:保留两个完整的抗原结合片段(Fab),但去除Fc段,需切断重链间的二硫键。
- 酶的作用位点:胃蛋白酶特异性作用于重链的铰链区(富含脯氨酸),生成F(ab')₂片段;而木瓜蛋白酶作用于其他区域,生成F片段。
破题关键点:
- 明确不同蛋白酶切割免疫球蛋白的位置与产物的关系。
- 排除磷酸酶类(B、D选项)和非特异性蛋白酶(A、C选项)。
胃蛋白酶的作用机制:
- 作用位点:胃蛋白酶特异性作用于重链之间的铰链区(富含脯氨酸)。
- 切割结果:切断重链间的二硫键,保留两个Fab片段通过二硫键连接,形成F(ab')₂片段。
其他选项分析:
- 胰蛋白酶(A):非特异性切割多个位点,无法精确制备F(ab')₂。
- 木瓜蛋白酶(C):作用于重链其他区域,生成F片段(单个Fab)。
- 磷酸酶(B、D):用于去磷酸化,与蛋白水解无关。