SDS电泳、凝胶过滤和超速离心都可以测定蛋白质的分子量。()A. 对B. 错

本题考查蛋白质分子量测定方法的相关知识。解题思路是分别分析SDS电泳、凝胶过滤和超速离心这三种方法是否能够用于测定蛋白质的分子量。

• SDS电泳：
  • SDS（十二烷基硫酸钠）是一种阴离子去污剂，它能与蛋白质结合，使蛋白质带上大量的负电荷，并且使蛋白质变性成棒状结构。
  • 在电场中，SDS - 蛋白质复合物的迁移率不再受蛋白质原有电荷和形状的影响，而主要取决于蛋白质的分子量大小。
  • 通过将未知分子量的蛋白质样品与已知分子量的标准蛋白在SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳上进行电泳，根据迁移率与分子量的对数呈线性关系，就可以测定未知蛋白质的分子量。
• 凝胶过滤：
  • 凝胶过滤又称分子筛层析，其原理是根据蛋白质分子大小不同进行分离。
  • 凝胶颗粒内部有许多大小不同的孔隙，当蛋白质混合样品通过装有凝胶颗粒的层析柱时，不同大小的蛋白质分子会进入凝胶颗粒内部的孔隙程度不同。
  • 大分子蛋白质不能进入凝胶颗粒内部，只能在凝胶颗粒之间的空隙中流动，因此流出层析柱的速度较快；小分子蛋白质可以进入凝胶颗粒内部的孔隙，在柱中停留的时间较长，流出速度较慢。
  • 通过将未知分子量的蛋白质样品与已知分子量的标准蛋白进行凝胶过滤层析，根据蛋白质的洗脱体积与分子量的关系，就可以测定未知蛋白质的分子量。
• 超速离心：
  • 超速离心是利用离心力将不同密度或不同沉降系数的物质进行分离的技术。
  • 蛋白质在离心力的作用下会发生沉降，其沉降速度与蛋白质的分子量、形状、密度等因素有关。
  • 通过测量蛋白质在离心场中的沉降系数，再结合其他参数，就可以计算出蛋白质的分子量。