限制性核酸内切酶作用特性不包括A. 酶辨认的碱基一般为4~6个B. DNA两链的切点常在同一位点C. 酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端D. DNA两链的切点常不在同一位点

限制性核酸内切酶的作用特性主要体现在以下几点：

1. 识别特定序列：通常识别4~6个碱基对的序列（对应选项A）。
2. 切割位点：在识别序列的特定位置切割双链DNA，切点常不在同一位点（对应选项D），导致产生粘性末端（对应选项C）。
3. 粘性末端的形成：切割后DNA片段的末端具有互补的单链部分，便于后续操作。

关键矛盾点：若切点在同一位点（选项B），则产生平末端，这与大多数限制酶的特性不符。

选项分析

选项A

限制酶的识别序列一般为4~6个碱基对，例如EcoRI识别序列GAATTC（6个碱基）。此描述正确，不是答案。

选项B

若DNA两链的切点在同一位点，则切割后产生平末端。但大多数限制酶的切点不在同一位置，因此此描述错误，是答案。

选项C

限制酶切割后，DNA片段的末端通常具有互补的单链部分（如EcoRI切割后形成sticky ends），此描述正确，不是答案。

选项D

限制酶的切点通常不在同一位置（例如EcoRI在识别序列的两侧不同位置切割），此描述正确，不是答案。