题目
分离亚细胞成分或大分子蛋白质最常用的方法是A. 超速离心法B. 低速离心法C. 高速离心法D. 选择性沉淀法E. 凝胶过滤法
分离亚细胞成分或大分子蛋白质最常用的方法是
A. 超速离心法
B. 低速离心法
C. 高速离心法
D. 选择性沉淀法
E. 凝胶过滤法
题目解答
答案
A. 超速离心法
解析
考查要点:本题主要考查细胞器分离方法的掌握情况,重点区分不同离心技术的应用场景。
解题核心思路:
- 离心速度决定分离对象:离心速度不同,颗粒沉降速度不同,从而分离出不同大小的结构。
- 超速离心法的特点:速度最快,适用于分离较小的亚细胞成分(如细胞膜、病毒)或大分子蛋白质。
- 其他方法的局限性:选择性沉淀法依赖溶液条件,凝胶过滤法基于分子筛原理,均非最直接的分离手段。
破题关键点:
- 亚细胞成分的分离通常通过逐步离心实现,超速离心是关键步骤。
- 大分子蛋白质的分离常需结合离心与层析技术,但题目选项中超速离心更直接对应题干需求。
超速离心法的工作原理是利用高速旋转产生的强大离心力,使悬浮液中的颗粒按大小和密度分层沉降。具体应用如下:
- 细胞匀浆制备:将细胞破坏后,通过不同速度离心分步收集细胞器。
- 低速离心:去除细胞核等大颗粒。
- 高速离心:收集线粒体、叶绿体等中等大小细胞器。
- 超速离心:最终分离细胞膜碎片或小分子细胞器(如核糖体)。
- 大分子蛋白质分离:通过调整离心时间,将不同分子量的蛋白质分层收集。
其他选项分析:
- 选择性沉淀法:依赖化学条件(如盐析、低温),适用于特定蛋白质的纯化,但效率较低。
- 凝胶过滤法:基于分子筛效应,常用于脱盐或分子量分级,而非直接分离亚细胞结构。