题目
常用核酸定性和定量检测方法是(1.0)A. 测磷酸法B. 与标准核酸分光比色法C. 定氮法D. 260nm紫外分光光度法E. 测核糖法
常用核酸定性和定量检测方法是(1.0)
A. 测磷酸法
B. 与标准核酸分光比色法
C. 定氮法
D. 260nm紫外分光光度法
E. 测核糖法
题目解答
答案
D. 260nm紫外分光光度法
解析
本题考查核酸定性和定量检测方法的相关知识。解题思路是对每个选项所涉及的方法进行分析,判断其是否为常用的核酸定性和定量检测方法。
- A选项:测磷酸法
- 核酸中含有磷酸基团,但测磷酸法操作复杂,且不能特异性地检测核酸,因为生物体内还有其他含磷酸的物质,所以不是常用的核酸定性和定量检测方法。
- B选项:与标准核酸分光比色法
- 这种方法虽然可以用于核酸定量,但需要有标准核酸作为对照,操作相对繁琐,不是最常用的方法。
- C选项:定氮法
- 定氮法主要用于测定蛋白质等含氮化合物的含量,因为蛋白质中氮含量相对稳定。而核酸中氮含量不具有特异性,不能准确地对核酸进行定性和定量检测,所以该方法不用于核酸检测。
- D选项:260nm紫外分光光度法
- 核酸分子中的嘌呤和嘧啶碱基具有共轭双键,在260nm波长处有特征性的吸收峰。通过测量样品在260nm处的吸光度(A₂₆₀),可以根据朗伯 - 比尔定律$A = \varepsilon cl$(其中$A$为吸光度,$\varepsilon$为摩尔吸光系数,$c$为物质的量浓度,$l$为光程)来计算核酸的含量。同时,还可以通过$A_{260}/A_{280}$的比值来判断核酸的纯度,所以260nm紫外分光光度法是常用的核酸定性和定量检测方法。
- E选项:测核糖法
- 测核糖法可以用于区分DNA和RNA,但操作相对复杂,且不能直接对核酸进行定量,不是常用的核酸定性和定量检测方法。