题目
PCR技术的操作步骤依次是( ( ))A. 高温变性 、中温延伸、低温复性B. 高温变性、低温复性、中温延伸C. 中温延伸、高温变性、低温复性D. 中温延伸、低温复性、高温变性
PCR技术的操作步骤依次是( ( ))
A. 高温变性 、中温延伸、低温复性
B. 高温变性、低温复性、中温延伸
C. 中温延伸、高温变性、低温复性
D. 中温延伸、低温复性、高温变性
题目解答
答案
B. 高温变性、低温复性、中温延伸
解析
PCR技术的核心是通过变性、退火、延伸三个步骤循环扩增特定DNA片段。
- 高温变性:使DNA双链解旋为单链,为后续步骤提供模板。
- 低温复性(退火):引物与单链DNA结合,形成互补配对。
- 中温延伸:Taq酶催化引物延伸,合成新链。
关键顺序:变性→退火→延伸,对应选项B的步骤。
PCR技术的操作步骤需严格遵循以下顺序:
- 高温变性(90-98℃):双链DNA在高温下解旋为单链。
- 低温复性(退火)(50-60℃):引物与单链DNA结合,形成局部双链区域。
- 中温延伸(72℃):Taq酶以引物为起点,延伸合成互补链。
错误选项分析:
- A选项中“中温延伸”在“低温复性”前,顺序错误。
- C、D选项起始步骤错误,未以“高温变性”开始。