题目
可以采用Oligo dA-纤维素,以亲和层析法将mRNA从细胞总RNA中分离出来。A. 正确B. 错误
可以采用Oligo dA-纤维素,以亲和层析法将mRNA从细胞总RNA中分离出来。
A. 正确
B. 错误
题目解答
答案
A. 正确
解析
考查要点:本题主要考查对mRNA分离方法的理解,特别是利用poly-A尾这一结构特征进行分离的原理。
解题核心:明确mRNA与其他RNA(如rRNA、tRNA)的结构差异,以及Oligo dA-纤维素在亲和层析中的作用机制。
关键点:
- mRNA的特征:mRNA的3'端具有poly-A尾(多聚腺苷酸序列),而其他RNA(如rRNA、tRNA)通常没有此结构。
- Oligo dA-纤维素的作用:该材料表面修饰了寡脱氧腺苷酸链,能通过碱基配对特异性结合mRNA的poly-A尾。
- 亲和层析原理:利用分子间的特异性结合,使目标分子(mRNA)与其他RNA分离。
亲和层析分离mRNA的步骤
- 制备层析柱:将Oligo dA-纤维素填充到层析柱中,形成结合基质。
- 加载总RNA:将细胞总RNA(含mRNA、rRNA、tRNA)加入层析柱。
- mRNA的poly-A尾与Oligo dA-纤维素结合,被吸附在柱上。
- 其他RNA因缺乏poly-A尾,不与纤维素结合,直接流出。
- 洗脱mRNA:通过调整盐浓度或使用竞争性脱氧腺苷酸,破坏mRNA与纤维素的结合,使mRNA被洗脱下来。
方法有效性
- 特异性:只有mRNA的poly-A尾能与Oligo dA-纤维素结合,其他RNA不被吸附,因此分离纯度高。
- 选择性:该方法专一针对mRNA,符合题目描述。